F-7000荧光分光光度计操作规程

日本日立F-7000荧光分光光度计基本操作规程1、开机顺序（1）开启计算机。（按图中圆圈按钮）（2）开启仪器主机电源。按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮（POWER）。（按下图中圆圈按钮）（3）观察主机正面面板右侧的XeLAMP和RUN指示灯依次亮起来，都显示黄绿色。XeLAMP灯先亮，RUN灯后亮。2、打开运行软件。（1）双击桌面图标（FLSolution2.1forF-7000）。主机自行初始化，扫描界面自动进入。（2）初始化结束后，须预热15-20分钟(若要进行定量分析，须预热30分钟以上，按界面提示选择操作方式。3.点击右上角Method,进行方法设置。若要预扫描，可选择3-Dscan（如下图）.设置好方法后（见下图），再点击右上角PreScan（如上图），在InstrumentMonitor菜单(见下图)的Datamode中选择Fluorescence,在EXStartWL中输入激发波长200，EXEndWL中输入激发波长500,在EMStartWL中输入发射波长210(有利于保护检测器)，在EMEndWL中输入700(nm)，为节约扫描时间，扫描速度Scanspeed可设置为30000。点击update,可知扫描需要多少时间。EXslit和EMslit一般选择5.0（若荧光强度太弱，可提高该数值，若强度太高，可降低该数值），PMTVoltage（电压）中可选择700（若荧光强度太弱，可提高该数值，若强度太高，可降低该数值），PMTVoltage0-1000v前面的方框打勾后，可在上面的PMTVoltage中随意填写电压值。在Response中选择Auto。在Processing菜单中(见下图)的YAxis中的Max中填5000或10000，Min中填0。Contour中填写10，在opendataprocessingwindowafterdataacquisitior前打勾。再点击右上角PreScan（如下图），进行预扫描。然后选择图谱中颜色最浓、最深、纵坐标最高的漩涡中心点，点击这个中心点，即可出现最佳激发波长、最佳发射波长及强度。若中心点太密，看不出（如上图），可点击右键，选择scale，将contour由10.00改为100。再点击确定。即可出现下图情况：点击纵坐标最高的漩涡中心，如上图和下图，在左上角即可出现最佳激发波长（EX）、最佳发射波长(EM)及强度。待预扫描结束后，可再次点击Method,进行重新设置，在General菜单的Measurement中选择Wavelengthscan（如下图）；在InstrumentMonitor菜单(见下图)的scanmode中选择Emission,Data中选择Fluorescence,在EXWL中输入预扫描中得到的最佳激发波长，在EMStartWL中输入比最佳激发波长大10nm的数据(有利于保护检测器)，在EMEndWL中输入700(nm)，Scanspeed中选择240或1200，EXslit和EMslit一般选择5.0（若荧光强度太弱，可提高该数值，若强度太高，可降低该数值），PMTVoltage（电压）中可选择700（若荧光强度太弱，可提高该数值，若强度太高，可降低该数值），PMTVoltage0-1000v前面的方框打勾后，可在上面的PMTVoltage中随意填写电压值。在Response中选择Auto,在Replicates中选择1，在Cycletime中填0。在Processing菜单中(见下图)的YAxis中的Max中填1000或2000或10000（可根据预扫描结果的荧光强度值填写Y轴荧光强度的最大值），Min中填0。Contour中填写10，在opendataprocessingwindowafterdataacquisitior前打勾。4.点击右上角SampleABC,进行数据存储模式及途径设置（见下图）。5.点击上图右上角Measure,即可对样品进行测试，测试完后在图谱右上角点击report，再点击文件菜单“另存为”，可将图谱数据另存为excel格式。6.96微孔板的操作，先安装相关装置，安装后（见下图）图中画圆圈的支架突出部分要压住它边上按钮。开机后在空白图谱上面可见MPR菜单(见下图)，点击该按钮。出现下图情景点击Datasave,可设置数据格式及存储路线（如下图）。点击上图中的Exchangeposition，放微孔板的支架会跳出来，然后可放入装有样品的微孔板，左下角为A1位置（见下图）。选择图中有样品的比色皿，如下图，点击Sampleset,可出现黄色背景，若点击Reset,可取消设置，黄色背景消失。可选择某一个样品进行预扫描（设置方法同上面叙述过的方法一样），根据预扫描结果，再对方法进行设置（设置方法同上面叙述过的方法一样），对批量样品进行测试。7、关机顺序（逆开机顺序实施操作）：（1）关闭运行软件FLSolution2.1forF-7000。（2）关闭仪器主机电源。（3）关闭计算机。注意事项（1）注意开机顺序。步骤1-（2）若是未先开主机，则程序会抓取不到主机讯号。（2）注意关机顺序。（3）为延长仪器使用寿命，扫描速度、负高压、狭缝的设置一般不宜选在高档。（4）关机后必须半小时（等氙灯温度降下）方可重新开机。F-7000荧光分光光度计使用操作步骤1、开机：（1）开启计算机。（2）开启仪器主机电源。按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮（POWER）。同时，观察主机正面面板右侧的XeLAMP和RUN指示灯依次亮起来，都显示绿色。2、计算机进入WindowsXP视窗后，打开运行软件（如图1）。（1）双击桌面图标（FLSolution2.1forF-7000）。主机自行初始化，扫描界面自动进入。（2）初始化结束后，须预热15-20分钟，按界面提示选择操作方式。图1FLSolution2.1扫描界面3、测试模式的选择：波长扫描（wavelengthscan）（1）点击扫描界面右侧“Method”。（2）在“General”选项中的“Measurement”选择“wavelengthscan”测量模式，如图2。图2Method--“General”选项的界面（3）在“Instrument”选项中设置仪器参数和扫描参数，如图3。图3Method---“Instrument”选项设置界面主要参数选项包括：①选择扫描模式“ScanMode”：Emission/Excitation/Synchronous（发射光谱、激发光谱和同步荧光）。②选择数据模式“DataMode”：Fluorescence/Phosphprescence/Luminescence(荧光测量、磷光测量、化学发光)。③设定波长扫描范围。A、扫描荧光激发光谱(Excitation)：需设定激发光的起始/终止波长（EXStart/EndWL）和荧光发射波长（EMWL）;B、扫描荧光发射光谱(Emission)：需设定发射光的起始/终止波长（EMStart/EndWL）和荧光激发波长（EXWL）;C、扫描同步荧光（Synchronous）：需设定激发光的起始/终止波长（EXStart/EndWL）和荧光发射波长（EMWL）。！！Attention：激发光终止与起始波长差不小于10nm。④选择扫描速度“ScanSpeed”（通常选240nm/min）。⑤选择激发/发射狭缝（EX/EMSlit）。⑥选择光电倍增管负高压“PMTVoltage”（一般选700V）。⑦选择仪器响应时间“Response”（一般选Auto）。⑧选择光闸控制“□ShutterControl”打√，以使仪器在光谱扫描时自动开启，而其他时间关闭。⑨选择“Report”设定输出数据信息、仪器采集数据的步长（通常选0.2nm）及输出数据的起始和终止波长（DataStart/End）。！！Attention：DataStart/End需与“Instrument”选项中设置一致，否则所得到的数据点会逐渐减少，而无法作图。（4）参数设置好后，点击“确定”。4、设置文件存储路径（1）点击扫描界面右侧“Sample”，如图4。图4Sample选项的界面（2）样品命名“Samplename”。（3）选中“□AutoFile”，打√。可以自动保存原始文件和TXT格式文本文档数据。（4）参数设置好后，点击“OK”。5、扫描测试（1）打开盖子，放入待测样品后，盖上盖子。（请勿用力）。（2）点击扫描界面右侧“Measure”（或快捷键F4），窗口在线出现扫描谱图。6、数据处理（1）选中自动弹出的数据窗口，如图5。（2）选择“Trace”，进行读数并寻峰等操作。图5扫描谱图窗口（3）上传数据。3、关机顺序（逆开机顺序实施操作）：（1）关闭运行软件FLSolution2.1forF-7000，弹出窗口，如图6。（2）选中“○Closethelamp，thenclosethemonitorwindows？”，打“⊙”。（3）点击“Yes”。窗口自动关闭。同时，观察主机正面面板右侧的XeLAMP指示灯暗下来，而RUN指示灯仍显示绿色。图6关闭运行软件（2）约十分钟后，关闭仪器主机电源，即按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮（POWER）。（目的是仅让风扇工作，使Xe灯室散热）。（3）关闭计算机。