Waters-LC-MS-日常维护参考手册

©2008NihonWatersK.K.日本WATERS株式会社技术服务部LC/MS的熟练使用方法©2008NihonWatersK.K.2LC/MS的故障©2008NihonWatersK.K.3熟练使用LC/MS的条件熟练使用LC/MS的条件—保持仪器环境条件处于良好状态—减少故障—发生故障时，能妥善处理日常维护非常重要©2008NihonWatersK.K.4什么是维护什么是维护？—确保仪器持续正常运作的保养、点检作业o仪器的环境条件保持最佳状态。同时，为防患于未然，避免发生故障，建议客户实施的日常维护©2008NihonWatersK.K.5建议客户实施的维护LC/MS需要注意哪些要点？需要实施哪些维护？有哪些复杂的操作？LC/MS看上去很复杂，但如果可以区分每个功能模块，并理解其功能要点，那就不复杂了。©2008NihonWatersK.K.6熟练使用LC/MS的方法：内容日常维护的相关事项故障对应稳定检测的条件©2008NihonWatersK.K.7LC/MS系统的日常维护LC/MS系统—HPLCo泵o自动进校器—MSo离子源oProbeo分析器—附属设备o真空泵（回转泵、涡旋泵）o氮气发生仪器o数据系统©2008NihonWatersK.K.8LC各模块的功能泵—稳定输送流动相自动进样器—准确注射检测样本样品管理器检测器自动进样器色谱柱恒温箱泵©2008NihonWatersK.K.9泵机的注意要点泵—确认压力o确认⊿压力（确认压力的变动值）•如压力发生变动，则基线与稳定时间会出错—确认流动相o使用符合HPLC要求等级与LC/MS要求等级的流动相•避免使用无挥发性的缓冲剂（磷酸缓冲剂等）o流动相排气o定期更换流动相•保持使用新鲜的水•更换时，泵的各管路残留溶剂不应继续使用。©2008NihonWatersK.K.10泵机的维护泵的维护—LC系统的清洗o拆卸色谱柱，按水/乙腈/甲醇/异丙醇=1:1:1:1的比例输送液体（添加乙酸使最终浓度为0.2%，可提高清洗效果）o清洗后，用水/甲醇（乙腈）=1:1的比例充分清洗。＊使用符合HPLC要求等级与LC/MS要求等级的溶剂清洗溶剂时避免流至MS侧。（可能会造成MS侧的污染）©2008NihonWatersK.K.11自动采样机的注意要点自动进样器—延迟o选择合适的针阀清洗溶剂•清洗溶剂可充分溶解样本物质•清洗溶剂与样本极性相符©2008NihonWatersK.K.12自动采样机的维护自动进样器的维护—进样针的更换o进样针的材质不同，吸附度也不同。©2008NihonWatersK.K.13MS各部分的功能MS—Probeo样本离子化后喷雾—离子源o将喷雾样本（离子）导入MS内部（分析器、检测器）—分析器o依据m/z分离离子—检测器o检测离子©2008NihonWatersK.K.14MS各部分的功能分析器离子源Probe检测器数据系统真空色谱柱©2008NihonWatersK.K.15Probe的功能Probe—对输送的流动相与样本施加高电压，进行离子化。—将流动相与样本转换为细微的液滴，并进行喷雾。©2008NihonWatersK.K.16Probe的注意要点确认喷雾—通过气流的流动状态，仔细确认Probe前端的喷雾。o是否向正前方喷雾o是否有堵塞（喷雾是否有断断续续的现象）*难以确认喷雾状态时，可借助手电筒等确认。确认压力—与通常分析时的压力比较o如拆下Probe的线管后出现压力下降，则应存在不锈钢毛细管的堵塞。防止不锈钢毛细管堵塞的注意要点—分析后输送流动相（有机溶剂），清洗不锈钢毛细管的内部。—为防止不锈钢毛细管内部发生堵塞，不可使用无挥发性的缓冲剂。©2008NihonWatersK.K.17Probe的维护不锈钢毛细管的更换Probe探头的更换—喷雾气体（喷雾样本的气体）不稳定©2008NihonWatersK.K.18离子源的功能离子源—离子化的样本经过离子源，进入质量分离部。©2008NihonWatersK.K.19离子源的注意要点离子源是易受污染的部分—注射样本时，仅注射作业就会导致离子源的污染。也就是说，防止离子源受污染的工作很重要。防止离子源受污染的工作—不可注射极高浓度的样本—使用阀门，仅将检测样本导入离子源。©2008NihonWatersK.K.20离子源的维护离子源（样本锥孔口）的定期超声波清洗—参照检测样本的性质，选择能够充分溶解的溶剂o如有多个检测样本，可选择水/乙腈/甲醇/异丙醇。—可能有些样本锥孔（口）的表面覆盖有绝缘膜，因此不能用超声波清洗，而必须使用纤维毛刷o研磨时，需注意避免压坏样本锥孔等孔洞。©2008NihonWatersK.K.21质量分离部（物质分离部）（分析器）的功能质量分离部（分析器）—依据m/z分离离子化的样本o通过MRM测定与SIR（SIM）检测时，仅通过特定的样本。—衍生离子的生成（MS/MS）©2008NihonWatersK.K.22质量分离部（分析器）的注意要点确认真空度—确认分析器与碰撞室的真空度o通过每日确认，明确仪器的环境条件。仪器周围的温度—温度变化引起的质量轴偏离o特别要注意短时间内急剧的温度变化©2008NihonWatersK.K.23质量分离部（分析器）的维护校准—必须定期进行质量轴的修正（校准）o抽真空后o每6个月*一般象TOF-MS那样检测精密质量的MS，其校准的频度也会相应增高。（与四极杆MS（四极杆质谱仪）相比）©2008NihonWatersK.K.24MS附属设备的功能MS附属设备—真空泵（回转泵，涡旋泵）o维持仪器真空—氮气发生仪器o提供样本喷雾所必需的氮气—数据系统（Software）o控制LC/MS系统©2008NihonWatersK.K.25机械泵的维护回转泵—润滑油o确认润滑油量（有无漏油）、颜色o确认泵机的声音o更换润滑油（每6个月至1年一次）—过滤器（油雾滤芯·齿形过滤器）o定期更换过滤器（每6个月至1年一次）—震气o将包括油的水分等物质排出至泵机外（每周一次）©2008NihonWatersK.K.26无油涡旋泵的维护无油涡旋泵—叶端密封o更换叶端密封（每6个月至1年一次）—震气o将泵机内部的密封垫排出至泵机外（每日）*无油涡旋泵不代表无需维护。XDS35i(EDWARDS)©2008NihonWatersK.K.27氮气发生仪器的维护依照运转时间进行的维护—更换过滤器*生产商不同，维护的内容也不同。详细内容请确认附带的操作手册。设置环境—氮气发生仪器周围必须保留一定的空间—由于其属于高产热的设备，因此必须注意周围的温度—尘埃（尘埃导致仪器内部温度上升）N2SupplierModel24S(仪表自动化系统）©2008NihonWatersK.K.28数据系统的维护数据系统—定期备份o硬盘可能会在某天突然崩溃。因此必须定期备份重要的数据。—碎片整理—检查剩余空间—定期重新启动o通过将内存区域导入闪存，实现数据系统的稳定。©2008NihonWatersK.K.29熟练使用LC/MS的方法：内容日常维护的相关事项故障对应稳定检测的要求©2008NihonWatersK.K.30面对故障时...首先，初步点检项目—确认已选择的方法—确认流动相•样本的配置方法—确认移动向的调整日期©2008NihonWatersK.K.31故障发生在LC？还是MS？LC/MS发生故障时，区分故障原因在于LC侧还是MS侧，可有助于更快地恢复故障。LCMS©2008NihonWatersK.K.32确认原因分类（1）连接UV检测器进行检测—为了用UV检测器确认，需准备高浓度样本UV检测器的结果是否正常？（UV可明确显示峰值，UV检测结果稳定）YES问题在MS侧（LC没有问题）问题在LC侧NO©2008NihonWatersK.K.33确认原因分类（I）MS侧的问题分析器离子源Probe检测器数据系统真空色谱柱UV检测器如在UV检测器结果中可见到峰值，但在MS结果中无峰值故障在MS侧©2008NihonWatersK.K.34确认原因分类（I）LC侧的问题分析器离子源Probe检测器数据系统真空色谱柱UV检测器UV检测器与MS的结果中均未见峰值故障在LC侧（未注射样本？）©2008NihonWatersK.K.35确认原因分类（II）确认注入—直接连接注射器与Probe，输送标准品（校正品等）—确认MS单体的峰值o强度o稳定性QuattroPremierXE注射泵Probe©2008NihonWatersK.K.36故障应对灵敏度低下不出峰重现性不良交叉污染质量轴偏差©2008NihonWatersK.K.37灵敏度低下灵敏度低下灵敏度低下离子源污染确认喷雾質量軸のズレ真空度流动相污染确认注入量附着离子LC侧MS侧质量轴偏差©2008NihonWatersK.K.38灵敏度低下：质量轴的偏差0%100%50%m/z609610监测离子12%质量轴发生偏差会引起灵敏度低下本次测试中，出现了约1/8（12%透过率/100透过率）灵敏度低下©2008NihonWatersK.K.39灵敏度低下灵敏度低下灵敏度低下离子源污染确认喷雾质量轴偏差真空度流动相污染确认注入量附着离子LC侧MS侧真空度©2008NihonWatersK.K.40灵敏度低下（真空度）真空状态不佳时Ｍ+©2008NihonWatersK.K.41灵敏度（真空度）真空状态良好时Ｍ+©2008NihonWatersK.K.42灵敏度低下灵敏度低下灵敏度低下离子源污染确认喷雾质量轴偏差真空度流动相污染确认注入量付加イオンLC侧MS侧附着离子©2008NihonWatersK.K.43灵敏度低下（附着离子）：附着质子MMMMMMH+MH+H+H+MMMH+H+H+H+H+H+©2008NihonWatersK.K.44MMMMMMH+MH+H+H+MMMH+H+H+H+H+Na+Na+Na+Na+Na+Na+灵敏度低下（附着离子）：附着质子，附着钠离子H+©2008NihonWatersK.K.45附着离子-光谱确认附着离子—定期确认光谱，确认附着离子的污染oMRM检测与SIM检测仅监测特定的样本，所以容易忽视附着离子与污染。©2008NihonWatersK.K.46故障应对灵敏度低下不出峰重现性不良交叉污染质量轴偏差©2008NihonWatersK.K.47未显示峰值不出峰未显示峰值有无喷雾電圧確認UV确认泵机（压力）配管确认阀门位置LC侧MS侧确认电压©2008NihonWatersK.K.48未显示峰值：Diagnostics©2008NihonWatersK.K.49故障应对灵敏度低下不出峰重现性不良交叉污染质量轴偏差©2008NihonWatersK.K.50再现性不良重现性不良重现性不良离子源污染确认喷雾流动相污染确认注入量LC侧MS侧©2008NihonWatersK.K.51故障应对灵敏度低下不出峰重现性不良交叉污染质量轴偏差©2008NihonWatersK.K.52交叉污染交叉污染交叉污染离子源污染LC的污染流动相污染小瓶LC侧MS侧©2008NihonWatersK.K.53交叉污染：LC侧交叉污染—LCo管道、过滤器、流动相专用瓶等物品在操作时的注意事项•清洗时请使用不含界面活性剂的清洁剂•禁止使用手霜等物品。请佩戴手套。•使用分装处理容器等o拆下色谱柱，输送水/乙腈/甲醇/同分异构体（添加乙酸直至最终浓度达到0.2%后，可提高清洗效果）•HPLC要求等级与LC/MS要求等级的溶剂作为流动相使用•清洗后，通过水/甲醇=50/50等进行更换o玻璃瓶•LC/MS质量保证瓶©2008NihonWatersK.K.54交叉污染：MS侧交叉污染—MSo离子源的清洗•参照样本的性质，使用溶剂实施超声波清洗。（一般情况下，使用水/甲醇=50/