实验动物和管理条例

实验动物和管理条例汪雪兰药理学教研室中山大学中山医学院[e-mail]•研究型实验的基本程序•课题申请书的写作技巧•论文的撰写•实验动物和管理条例•动物实验操作–青蛙–小鼠–大鼠–家兔动物•品系•性别•年龄•体重小鼠1、染色体：20对2、毛色基因：主要受C-c、B-b、A-a三个基因位点支配3、外形：尾部有四条明显的血管，背腹面各有一条静脉，两侧各有一条动脉4、生活习性：①小鼠胆小怕惊，性情温顺，一般不会主动攻击人，但仍保持一些野生习性②小鼠喜居光线暗淡的安静环境，昼伏夜动，在晚上进食、交配、分娩，傍晚后1～2小时和黎明前是活动高峰期③小鼠对外界环境反应敏感，适应性差，怕强光或噪音刺激④雄鼠好斗，性成熟的雄鼠在一起，易发生互斗而咬伤⑤小鼠喜欢啃咬，因小鼠属啮齿类动物，牙齿无牙根，不停地生长。因此，小鼠靠啃咬磨牙来抵消牙齿的不停生长5、寿命一般开放饲养条件下，小鼠寿命为1.5～2年，而无菌小鼠，寿命可达3年以人60岁为老年年龄，小鼠进入老年的相应时间为1.3年（即约15个月）6、体温体温37～39℃7、血量总血量：占体重1/151.3ml/20克小鼠心脏采血一次可采0.5ml小鼠解剖学特点1、小鼠下颌骨的喙状突较小，髁状突发达2、小鼠上下颌各有二个门齿和六个臼齿，共16个门齿能终生不断生长，以经常磨损来维持齿端的长短，保持其恒定3、小鼠脾脏不但有贮血功能，而且还有明显的造血功能，这是和大动物（猴、狗）及人不同的地方。大动物和人的脾脏仅有贮血功能，而无造血功能。小鼠脾脏含有造血细胞，包括巨核细胞，原始造血细胞等组成造血灶巨核细胞核较大，有时被误认为癌细胞小鼠骨髓为红骨髓，而无黄骨髓，终生造血4、小鼠淋巴系统小鼠淋巴系统特别发达，外来刺激可使淋巴系统增生，小鼠易患淋巴系统疾病5、雌鼠乳腺极为发达乳头共5对，3对位于胸部，乳腺可延续到背、颈部，2对位于腹部，乳腺延续到鼠鼷部，会阴和腹部两侧，并与胸部乳腺相连6、小鼠体表无汗腺，散热通常靠小鼠尾部小鼠在生物医学研究中的应用1、各种药物筛选性实验2、生物效应测定和药物的效价比较试验主要用封闭群小鼠作血清、疫苗等生物鉴定工作3、药物毒性试验，如LD504、肿瘤学研究小鼠原发性肿瘤与人体肿瘤接近，常选用小鼠的各种自发性肿瘤作为抗肿瘤药的工具还可用小鼠诱发各种肿瘤模型，进行肿瘤病因学、发病学和防治研究5、微生物、寄生虫病学研究常用小鼠品系1、BALB/c-nu/nu2、NOD-SCID3、BALB/c4、C57BL/6J5、DBA/26、ICR7、NIH8、KM（昆明）大鼠生物学特性1、大鼠为夜间活动的杂食性动物，喜吃各种煮熟的动物肉2、一般情况下，性格较温顺，很少主动攻击人，但被激怒、袭击或被抓捕时，容易攻击人。大鼠体内缺乏维生素A时，经常咬人，或二鼠咬斗致死3、大鼠汗腺极不发达，仅在爪垫上有汗腺，尾巴是散热器官。在高温情况下，大鼠借助流出大量唾液来调节体温，一旦唾液腺机能失调或不足以满足调节热量时，则会发生中暑死亡4、大鼠嗅觉灵敏5、大鼠无呕吐反应，对许多药物易产生耐药性6、对营养缺乏敏感，可发生典型的缺乏症状7、繁殖力强性成熟：♂2月龄；♀2.5月龄性周期：4～5天妊娠期：21～23天8、寿命一般开放饲养条件下，大鼠寿命为2.5～3年，无菌大鼠寿命可达4年，以人60岁为老年年龄，大鼠进入老年的相应时间为1.7年，即20个月9、体温：37.5℃10、血总量：占体重1/15大鼠解剖学特点1、染色体21对2、大鼠无胆囊，胆汁通过总胆管进入十而二指肠3、大鼠肝脏再生能力强，切除60～70%的肝叶仍有再生能力4、右肺分四叶，左肺单叶，适宜左支气管肺泡灌洗5、大鼠子宫为复合体，成双子宫，双子宫颈6、大鼠神经系统与人类相似7、大鼠磨牙的解剖与人类相似，给予致龋齿菌丛或致龋齿食物可产生与人一样的龋齿损害大鼠在生物医学中的应用一、营养、代谢性疾病研究二、药物学研究三、炎症研究大鼠的踝关节对炎症反应很敏感四、行为学研究大鼠具有行为情绪的变化特征，行为表现多样，情绪敏感，广泛应用于高级神经活动的研究，如走迷宫常用大鼠品系1、S.D大鼠2、Wistar大鼠3、LEWIS4、F344动物模型的设计原则‹可比性0尽可能近似于人类疾病的情况‹可重复性0动物、环境条件、实验方法步骤、操作技术0药品‹专一性0一种方法只能复制出一种模型‹适用性和可控性‹易行性和经济性荷瘤裸鼠模型建立动物模型的制作‹要点0制作方法–找现成的6书籍6文献6做过模型的实验室0避免低水平的重复或缺乏科学依据的盲动0昀可比拟的动物实验药物（途径、制剂、浓度、给药量）次次人与动物及各类动物间药物剂量的换算方法•A（体表面积，以m2计算）=R×(W2/3)–W为体重（Kg）–R为体型指数•小白鼠0.059，大白鼠0.09、豚鼠0.099•家兔0.093、猫0.082、犬0.104、•猴0.111、人0.1•甲动物所需的剂量=[乙动物剂量（mg/kg）×甲动物Km]/乙动物Km影响动物实验结果的因素„动物因素„种属„品种、品系„年龄、体重及性别„生理状态„健康状况„环境因素„温、湿度„气流和清洁度„光照„噪声„动物饲养密度„动物营养„饲喂环节„环境微生物„技术因素„动物选择„实验季节„昼夜过程„麻醉深度„手术技巧„实验用药„对照问题„实验准备和实验重复大、小鼠配合颗粒饲料常用实验动物的饲料参考配方原料大鼠小鼠地鼠豚鼠家兔大麦粉(黄豆粉)--(12)-12小麦粉202021--玉米粉3830152010高粱粉-7---豆饼粉2025132512麸皮10581214苜蓿草粉---3530脱水蔬菜----16鱼粉(进口)56824.5酵母粉1352-骨粉1252.51食盐1110.50.5鱼肝油1-1--植物油（鸡蛋）2-(11)--矿物质添加剂10.8-0.8-维生素添加剂0.10.2-0.2-各种动物每日的饮水需要量动物品种饮水需要量小鼠（成熟龄）4～7ml大鼠（50g）20～45ml豚鼠（成熟龄）85～150ml兔（1.4～2.3kg）60～140ml/kg(体重)金黄地鼠（成熟龄）8～12ml小型猪（成熟龄）1～1.9l狗（成熟龄）25～35ml/kg(体重)猫（2～4kg）100～200ml红毛猴（成熟龄）200～950ml各种饮水瓶（大、小鼠用）4-1不同环境温度时戊巴比妥钠给药导致大鼠死亡比较环境温度(℃)给药动物数(只)死亡动物数(只)死亡率(%)　122020100142020100162020100　18201050　202010502220105024201050262073528206303020115532201680表4-2温度对三种药物LD50的影响LD50（mg/kg）药物15.5℃27℃苯异丙胺(Amphetamine)197.090.0盐酸脱氧麻黄碱(Methedrine)111.033.2麻黄碱(Ephedrine)477.1565.02012-11-2031实验动物质量监测‹遗传质量监测‹微生物学与寄生虫学监测‹饲料质量监控‹环境质量监测美国的实验动物管理立法1、《动物福利法》2、《食品安全法》3、《实验动物饲养与管理指南》4、《人道主义饲养和使用实验动物的公共卫生服务方针》5、《美国政府关于在测试、科研和培训中脊椎动物的使用和管理原则》美国的实验动物管理立法6、《犬、猫饲养,护理,治疗,转运细则》7、《豚鼠和仓鼠的人道处理、护理、治疗和运输规范》8、《非人灵长类动物的人道主义护理、治疗和运输标准》9、《对狗、猫、兔、大鼠、豚鼠、人以外的灵长类和海洋中的哺乳动物以外的恒温动物的人性化饲养、管理、处理和运输的实施细则》我国主要实验动物管理法规1、《实验动物管理条例》2、《实验动物质量管理办法》3、《实验动物许可证管理办法（试行）》4、《实验动物种子中心管理办法》5、《省级实验动物质量检测机构技术审查准则》我国主要实验动物标准1、《实验动物微生物等级及监测》2、《实验动物寄生虫等级及监测》3、《实验动物环境及设施》4、《哺乳类实验动物的遗传质量控制》5、《实验动物配合饲料通用质量标准》6、《实验动物配合饲料卫生标准》广东省主要实验动物管理法规1、《广东省实验动物管理办法》1988年2、《广东省实验动物许可证管理细则（试行）》2002年3、《关于在我省全面实施实验动物国家标准2001修订版的通知》2003年4、《广东省实验动物管理条例》2010年6月2号通过；2010年10月1号执行《广东省实验动物管理条例》•第四章：生物安全与实验动物福利–第二十二条实验动物发生传染性疾病时，从事实验动物生产、使用的单位和个人应当及时采取隔离、预防控制措施，防止动物疫情扩散，同时报告当地畜牧兽医主管部门、动物防疫监督机构；当发生人畜共患病时，还应当立即报告当地疾病预防控制机构实验动物误伤的处理‹实验动物咬伤救治在伤口上方扎止血带，然后用高猛酸钾或双氧水冲洗伤口，并用5％石炭酸或硝酸烧灼腐蚀伤处。伤口若比较大或自己不好处理，昀好去医院处理‹同时24小时内到防疫站注射疫苗（如狂犬疫苗、流行性出血热疫苗等）戴手套1、人畜共患病毒性疾病：流行性出血热、埃博拉病毒感染、马堡病毒疾病、淋巴性脉络丛脑膜炎病毒感染、灵长类痘病毒病、麻疹、鸡新城疫、A型肝炎、猴免疫缺陷综合征、狂犬病、流感、节肢动物携带性病毒感染2、人畜共患立克次氏体病：Q热、猫抓热重要的人畜共患病重要的人畜共患病3、人畜共患细菌性疾病：李斯特菌、猴结核病、鸚鹉热、鼠咬热、鼠疫、布氏杆菌病、钩端螺旋体病、沙门氏菌病、志贺氏菌病、肠炎耶森氏菌病4、人畜共患病原虫性疾病：弓形虫病、黎形虫病、隐孢子虫病、阿米巴原虫病、大肠纤毛虫病实验动物福利动物福利：强调保证动物健康、快乐的外部条件•解除动物的痛苦，让动物享有如下五大自由，是保障动物福利的基本原则：–享有不受饥渴的自由–享有生活舒适的自由–享有不受痛苦伤害和疾病的自由–享有生活无恐惧和悲伤感的自由–享有表达天性的自由实验动物福利‹对实验动物进行手术时，应当进行有效的麻醉‹需要处死实验动物时，应当实施安乐死术‹在开展动物实验项目时，应当制定保证实验动物福利、符合实验动物伦理要求的实验方案；有条件的应当设立实验动物福利伦理组织，对实验方案进行审查，对实验过程进行监督管理‹善待实验动物，推行3R方案，即Replacement（替代）、Reduction（减少）和Refinement（优化）KeyPointsKeyPoints•研究型实验的基本程序•课题申请书的写作技巧•论文的撰写•实验动物和管理条例•动物实验操作–青蛙–小鼠–大鼠–家兔尊重生命！善待动物！谢谢！