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医院污水监测方法细菌总数及粪大肠菌群的测定1.采样时间在消毒后1小时,排放前进行采样2.采样方法1)水样瓶采集前必须进行灭菌,并需保证在装运、保持过程中不受污染2)在采集水样时,先将出水口消毒,然后将水龙头完全打开,放水5-10min,以排除管道内的贮水后再采水样。3)如果是经加氯处理的污水,应按每500ml加1.5%硫代硫酸钠2ml中和余氯,终止余氯的杀菌作用。4)所才的水量为采样瓶容量的80%左右,以便在检验时可以充分摇动水样。5)水样从采集到检验一般不超过2h,如放冰箱保存,也应不超过4h.3.细菌总数的测定:细菌总数是指1ml水样在营养琼脂培养基中,于37℃培养48h后,所生长的细菌菌落数。操作方法:1)无菌操作吸取10ml充分混匀的水样注入盛有90mln灭菌蒸馏水的玻璃瓶中,混匀成1:10稀释液。2)吸取1:10稀释液1ml注入盛有9ml灭菌水的试管中,混匀成1:100稀释液。3)用涂抹法或倾注法接种平皿。4)置37℃培养48h后计数菌落数,报告1ml水样的细菌总数。4.粪大肠菌群的检验方法采用发酵法。步骤:①初发酵试验②平板分离③复发酵试验⑴初发酵试验1)将水样作1:10及1:100稀释2)水样的接种1:100稀释水样(相当于原水样0.1ml)1ml原水样1ml以上分别注入10ml普通浓度(单料)乳糖蛋白胨液中(内有倒管)。原水样10ml注入5ml3倍浓缩(三料)乳糖蛋白胨液中(内有倒管)如水样较清洁,再取原水样10ml注入50ml3倍浓缩乳糖蛋白胨液中,上述发酵管置44℃,24h培养。⑵平板分离将产酸产气及只产酸不产气的发酵管,分别接种伊红美蓝培养基上,于37℃培养18——24小时,挑去深紫黑色、具有金属光泽的菌落(或紫黑色,不带或略带金属光泽的菌落;淡紫红色、中心色较深的菌落),进行涂片、染色、镜检。⑶复发酵试验挑取镜检为革兰阴性无芽孢杆菌的典型菌落1—3革,接种于一支单料乳糖发酵管内,44℃培养24h,产酸产气即证实有大肠菌群存在。⑷结果报告根据证实有大肠菌群存在的阳性管(瓶)数查表1或表2,报告没升水样中的粪大肠菌群数。5、污水中沙门菌、志贺菌检验步骤:污水样品过滤、稀释、增菌处理:取200ml污水,用灭菌滤膜进行抽滤;用100ml二倍浓度SF(亚硒酸盐增菌液)把滤膜上截留的杂质洗脱倒灭菌三角烧瓶内,充分摇匀,置于37℃培养24—48h;挑选可疑菌落接种于双糖37℃培养18—24小时。鉴定:生化、血清学试验,检验结果报告一定体积样品中存在或不存在沙门三、报告填写编号:格式:ZG-XJ-JL细菌总数检测报告样品名称:检测日期:生产日期:稀释度101001000菌落计数(CFU)3503302802603238平均数(CFU)结果(CFU)检测人:审核人:编号:格式:ZG-XJ-JL大肠杆菌检测报告样品名称:检测日期:生产日期:稀释度101001000初发酵产气管数复发酵管数MPN表结果检测人:审核人:
本文标题:医院污水监测方法
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