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山东绿都生物科技有限公司山东绿都生物科技有限公司山东绿都生物科技有限公司山东绿都生物科技有限公司绿都动物疾病检测绿都动物疾病检测绿都动物疾病检测绿都动物疾病检测绿都动物疾病检测绿都动物疾病检测绿都动物疾病检测绿都动物疾病检测产品简介产品简介产品简介产品简介产品简介产品简介产品简介产品简介主讲人:主讲人:主讲人:主讲人:董艳凯董艳凯董艳凯董艳凯动物疫病快速检测产品动物疫病快速检测产品动物疫病快速检测产品动物疫病快速检测产品绿都绿都绿都绿都ELISAELISAELISAELISA试剂盒试剂盒试剂盒试剂盒介绍介绍介绍介绍绿都绿都绿都绿都胶体金胶体金胶体金胶体金试剂盒试剂盒试剂盒试剂盒介绍介绍介绍介绍绿都绿都绿都绿都PCRPCRPCRPCR试剂盒介绍试剂盒介绍试剂盒介绍试剂盒介绍动物疫病快速检测产品动物疫病快速检测产品动物疫病快速检测产品动物疫病快速检测产品检测产品检测产品检测产品检测产品1111、、、、ELISAELISAELISAELISA抗体检测试剂盒抗体检测试剂盒抗体检测试剂盒抗体检测试剂盒2222、胶体金抗体检测试剂盒、胶体金抗体检测试剂盒、胶体金抗体检测试剂盒、胶体金抗体检测试剂盒3333、、、、PCRPCRPCRPCR抗原检测试剂盒抗原检测试剂盒抗原检测试剂盒抗原检测试剂盒绿都绿都绿都绿都ELISAELISAELISAELISA试剂盒试剂盒试剂盒试剂盒ELISAELISAELISAELISA简介简介简介简介绿都绿都绿都绿都ELISAELISAELISAELISA试剂盒测抗体(间接法)试剂盒测抗体(间接法)试剂盒测抗体(间接法)试剂盒测抗体(间接法)绿都试剂盒研制进展绿都试剂盒研制进展绿都试剂盒研制进展绿都试剂盒研制进展ELISAELISAELISAELISA概述概述概述概述1971197119711971年年年年ELISA(EnzymeLinkedImmunoSorbentAssay)ELISA(EnzymeLinkedImmunoSorbentAssay)ELISA(EnzymeLinkedImmunoSorbentAssay)ELISA(EnzymeLinkedImmunoSorbentAssay)由瑞典由瑞典由瑞典由瑞典学者学者学者学者EngvallEngvallEngvallEngvall和和和和PerlmannPerlmannPerlmannPerlmann,荷兰学者,荷兰学者,荷兰学者,荷兰学者VanWeemanVanWeemanVanWeemanVanWeeman和和和和SchuursSchuursSchuursSchuurs分别分别分别分别报道,将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,报道,将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,报道,将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,报道,将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,称为酶联免疫吸附测定法(称为酶联免疫吸附测定法(称为酶联免疫吸附测定法(称为酶联免疫吸附测定法(ELISAELISAELISAELISA))))。。。。酶免疫技术酶免疫技术酶免疫技术酶免疫技术酶免疫组化酶免疫组化酶免疫组化酶免疫组化酶免疫测定酶免疫测定酶免疫测定酶免疫测定均相酶免疫测定均相酶免疫测定均相酶免疫测定均相酶免疫测定非均相酶免疫测定非均相酶免疫测定非均相酶免疫测定非均相酶免疫测定固相酶免疫测定固相酶免疫测定固相酶免疫测定固相酶免疫测定液相酶免疫测定液相酶免疫测定液相酶免疫测定液相酶免疫测定ELISAELISAELISAELISA基本原理基本原理基本原理基本原理�抗原或抗体固相化:抗原或抗体固相化:抗原或抗体固相化:抗原或抗体固相化:使抗原或抗体使抗原或抗体使抗原或抗体使抗原或抗体物理性的物理性的物理性的物理性的结合到某种固相载体结合到某种固相载体结合到某种固相载体结合到某种固相载体的的的的表面,并保持其表面,并保持其表面,并保持其表面,并保持其免疫活性免疫活性免疫活性免疫活性。。。。�抗原或抗体酶标化:抗原或抗体酶标化:抗原或抗体酶标化:抗原或抗体酶标化:使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。。。。�显色反应:显色反应:显色反应:显色反应:结合在固相载体上酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。结合在固相载体上酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。结合在固相载体上酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。结合在固相载体上酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关本中受检物质的量直接相关本中受检物质的量直接相关本中受检物质的量直接相关。。。。ELISAELISAELISAELISA基本原理图示基本原理图示基本原理图示基本原理图示洗涤的方法将固相载体上的复合物与其他物质分离将抗原或抗体固定于合适的载体上,并保持其生物活性使抗原或抗体与某种酶连接,形成酶标抗原或抗体加入酶反应底物,复合物上的酶催化底物使其分解,氧化或还原成有色产物待测样品与酶标抗原或抗体反应ELISAELISAELISAELISA测抗原(测抗原(测抗原(测抗原(AgAgAgAg)或抗体()或抗体()或抗体()或抗体(AbAbAbAb))))三要素:三要素:三要素:三要素:�抗原或抗体的固相化抗原或抗体的固相化抗原或抗体的固相化抗原或抗体的固相化�抗原或抗体的酶标记抗原或抗体的酶标记抗原或抗体的酶标记抗原或抗体的酶标记�底物被酶催化成为有色产物底物被酶催化成为有色产物底物被酶催化成为有色产物底物被酶催化成为有色产物————定性和定量定性和定量定性和定量定性和定量––––放大免疫反应的信号放大免疫反应的信号放大免疫反应的信号放大免疫反应的信号SSSS+H+H+H+H2222OOOO2222ssssEEEEEEEE************************ELISAELISAELISAELISA主要类型主要类型主要类型主要类型双抗体夹心法测抗原(常用)双抗体夹心法测抗原(常用)双抗体夹心法测抗原(常用)双抗体夹心法测抗原(常用)�夹心法夹心法夹心法夹心法双抗原夹心法测抗体双抗原夹心法测抗体双抗原夹心法测抗体双抗原夹心法测抗体�间接法测抗体(常用)间接法测抗体(常用)间接法测抗体(常用)间接法测抗体(常用)竞争法测抗原竞争法测抗原竞争法测抗原竞争法测抗原�竞争法竞争法竞争法竞争法竞争法测抗体竞争法测抗体竞争法测抗体竞争法测抗体�捕获包被法测抗体捕获包被法测抗体捕获包被法测抗体捕获包被法测抗体�亲和素亲和素亲和素亲和素----生物素生物素生物素生物素ELISAELISAELISAELISA法法法法绿都绿都绿都绿都ELISAELISAELISAELISA试剂盒测抗体(间接法)试剂盒测抗体(间接法)试剂盒测抗体(间接法)试剂盒测抗体(间接法)�间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体以检测间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体以检测间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体以检测间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体以检测与固相抗原结合的受检抗体,故称为间接法与固相抗原结合的受检抗体,故称为间接法与固相抗原结合的受检抗体,故称为间接法与固相抗原结合的受检抗体,故称为间接法。。。。�间接法的优点是只要变换包被抗原就可利用同一酶标抗抗体建立检测间接法的优点是只要变换包被抗原就可利用同一酶标抗抗体建立检测间接法的优点是只要变换包被抗原就可利用同一酶标抗抗体建立检测间接法的优点是只要变换包被抗原就可利用同一酶标抗抗体建立检测相应抗体的方法。相应抗体的方法。相应抗体的方法。相应抗体的方法。�我公司试剂盒采用纯化的特异性抗原包被酶标板。在实验中加入待检我公司试剂盒采用纯化的特异性抗原包被酶标板。在实验中加入待检我公司试剂盒采用纯化的特异性抗原包被酶标板。在实验中加入待检我公司试剂盒采用纯化的特异性抗原包被酶标板。在实验中加入待检血清,若样本中含有病毒特异性抗体,则抗体与微孔板上的固相抗原血清,若样本中含有病毒特异性抗体,则抗体与微孔板上的固相抗原血清,若样本中含有病毒特异性抗体,则抗体与微孔板上的固相抗原血清,若样本中含有病毒特异性抗体,则抗体与微孔板上的固相抗原结合,经洗涤去除其它成分后,再加入酶标二抗,与酶标板上的抗原结合,经洗涤去除其它成分后,再加入酶标二抗,与酶标板上的抗原结合,经洗涤去除其它成分后,再加入酶标二抗,与酶标板上的抗原结合,经洗涤去除其它成分后,再加入酶标二抗,与酶标板上的抗原抗体复合物结合。再经洗涤,去除未结合的酶结合物,最后加入底物抗体复合物结合。再经洗涤,去除未结合的酶结合物,最后加入底物抗体复合物结合。再经洗涤,去除未结合的酶结合物,最后加入底物抗体复合物结合。再经洗涤,去除未结合的酶结合物,最后加入底物,与酶反应形成蓝色产物(加入终止液后变为黄色)。,与酶反应形成蓝色产物(加入终止液后变为黄色)。,与酶反应形成蓝色产物(加入终止液后变为黄色)。,与酶反应形成蓝色产物(加入终止液后变为黄色)。PCVCap2PCVCap2PCVCap2PCVCap2蛋白蛋白蛋白蛋白CSFVE2CSFVE2CSFVE2CSFVE2蛋白蛋白蛋白蛋白RHDVVP60RHDVVP60RHDVVP60RHDVVP60蛋白蛋白蛋白蛋白�试剂盒组成及成分性状试剂盒组成及成分性状试剂盒组成及成分性状试剂盒组成及成分性状�试剂盒操作步骤试剂盒操作步骤试剂盒操作步骤试剂盒操作步骤1.1.1.1.取阴、阳性对照及稀释好的待检样品加入相应孔中,并做好记录;取阴、阳性对照及稀释好的待检样品加入相应孔中,并做好记录;取阴、阳性对照及稀释好的待检样品加入相应孔中,并做好记录;取阴、阳性对照及稀释好的待检样品加入相应孔中,并做好记录;2.2.2.2.37373737℃孵育孵育孵育孵育1h1h1h1h;将各孔的液体弃入废液桶,每孔加;将各孔的液体弃入废液桶,每孔加;将各孔的液体弃入废液桶,每孔加;将各孔的液体弃入废液桶,每孔加250250250250μμμμllll的洗涤液(试剂盒内的洗涤液(试剂盒内的洗涤液(试剂盒内的洗涤液(试剂盒内20202020××××浓缩洗涤液需用蒸馏水或去离子水稀释后方可使用。如有结晶,需先溶解浓缩洗涤液需用蒸馏水或去离子水稀释后方可使用。如有结晶,需先溶解浓缩洗涤液需用蒸馏水或去离子水稀释后方可使用。如有结晶,需先溶解浓缩洗涤液需用蒸馏水或去离子水稀释后方可使用。如有结晶,需先溶解后,方可进行稀释)进行洗板,重复后,方可进行稀释)进行洗板,重复后,方可进行稀释)进行洗板,重复后,方可进行稀释)进行洗板,重复5555次,每次次,每次次,每次次,每次30s30s30s30s;;;;3.3.3.3.每孔加每孔加每孔加每孔加100100100100μμμμllll酶标结合物;重复步骤酶标结合物;重复步骤酶标结合物;重复步骤酶标结合物;重复步骤2222;;;;4.4.4.4.每孔加每孔加每孔加每孔加100100100100μμμμllll底物液,底物液,底物液,底物液,37373737℃孵育孵育孵育孵育10min10min10min10min(避光显色);(避光显色);(避光显色);(避光显色);5.5.5.5.每孔加每孔加每孔加每孔加100100100100μμμμllll的终止液;的终止液;的终止液;的终止液;6.6.6.6.立刻于立刻于立
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