西瓜种子带菌检测及杀菌剂消毒处理效果[1].

第5卷第3期2003年9月农药学学报.5No.3Vol2003西瓜种子带菌检测及杀菌剂消毒处理效果吴学宏,刘西莉,刘鹏飞,,3(中国农业大学,)摘要:采用离体平皿法对来自新疆等4、分离纯化和鉴定,并测定了7。结果表明,种子表面携带的优.、根霉属Rhizopusspp.、曲霉属Aspergillusspp.、交链孢属根霉属和曲霉属;不同Alterna.Fusariumspp.;种子内部寄藏真菌主要为青霉属、品种之间种子表面携带真菌种类差异较大,种子内部寄藏真菌种类差异不明显;种壳带菌率一般高于种仁带菌率。15%・霜・福悬浮种衣剂、福美双和代森锰锌对种子带菌消毒效果优于多菌灵、敌磺钠、霉灵、拌种灵和甲霜灵。关键词:西瓜;种子带菌;杀菌剂;消毒处理中图分类号:S482.2;S436.42文献标识码:A文章编号:100827303(2003)0320039206西瓜是我国重要的经济作物,近年来生产发展迅速,种植面积约占世界总面积的40%[1,2]。产前对种子进行保健处理是提高播种品质和防治西瓜种苗病害最简单、经济、有效的方法之一[3～5]。西瓜种子处理技术的开发和应用建立在对种子的带菌种类和健康状况以及种苗期主要种传和土传病害发生情况研究的基础之上。国内外有关学者在这方面进行的研究工作表明,印度栽培的主要西瓜品种种子传带的真菌种类为Rhizoctoniaspp.,Fusariumspp.,Colletotrichumspp.,Alternariaspp.,Macrophominaphaseolina,Aspergillusniger,[6],我国部分西瓜品种种子寄藏真菌主要为镰孢属(FusariumPenicilliumspp.andRhizopusspp.黑斑oxysporumf.sp.niveum,F.semitectum,F.equiseti,F.graminearum,F.cuneiforme)、病菌Alternariacucumerium、根霉属Rhizopusspp.等[7～10]。国内外的研究报道各有异同之处。本试验旨在对我国新疆、安徽、北京和福建等西瓜主产区栽培的14个品种进行种子带菌检测和杀菌剂消毒处理,据此筛选出合适的药剂,以期为生产中西瓜种子处理防治种传真菌病害提供理论依据和技术指导。1材料与方法1.1西瓜品种西瓜品种共14个:火洲一号,早佳8424,郑杂9号(新疆新特丽种苗有限公司提供);金花宝(新疆新丰种子有限公司提供);黑蜜二号(新疆阜康市农业技术服务公司提供);兴农一号,京欣一号(北京航兴农业技术服务中心提供);特大红宝王(香港蔡兴利菜种行有限公司提供);新红宝,西农8号(安徽合肥丰乐种业有限责任公司提供);花龙,深新一号,裕龙17号,百龙(福建厦门市农龙种苗公司提供)。:吴学宏(19722),男,湖北钟祥人,硕士,助理研究员,主要从事种子病理和药理学研究工作.基金项目:国家自然科学基金资助项目(30070864).40农药学学报.5Vol1.2供试杀菌剂50%福美双(thiram)WP、50%多菌灵(carbendazi70%霉灵(hymexazol)WP、m)WP、70%代森锰锌(mancozeb)WP、70%敌磺钠(fenaminosulf)WP及35%甲霜灵(metalaxyl)拌种剂均为市售;质量分数为1%和5%的NaClO(自行配制);30%拌种灵(iazol)种衣剂、15%・霜・福悬浮种衣剂(hymexazol∶mth=)由中国农业大学种衣剂研究发展中心提供。1.3种子带菌检测[11～13]1.3.1粒种子,放入100mL锥形瓶中,加入25mL10mL,以2000r�min的转速离心10min,弃上清液,再[14]加入3mL浮载后吸取100ΛL加到直径为9cm的PDA平板上,涂匀,每个处理4。相同操作条件下设无菌水空白对照。放入25～28℃温箱中黑暗条件下培养5d后观察,记录种子外部带菌种类和分离比例。1.3.2种子内部带菌检测将每个品种的种子在5%NaClO溶液中浸泡5min,用无菌水冲洗3遍,取其中40粒种子将种壳和种仁解剖开,将种仁放置在1%NaClO溶液中浸泡3min,用无菌水冲洗3遍。将同一品种的整粒种子、种壳和种仁分别均匀摆放在直径为9cm的PDA平板上,每皿摆放10粒或10个组织块,每个处理4次重复。在25～28℃温箱中12h光照�黑暗交替下培养5～7d后检查,记录种子带菌情况、不同部位的真菌种类和分离频率。1.4种子带菌鉴定将分离到的真菌分别进行纯化、镜检和转管保存。根据真菌培养性状和形态特征,参照文献[15,16]进行鉴定。1.5药剂消毒处理效果检测供试西瓜种子分别进行以下处理:50%福美双WP、50%多菌灵WP、70%霉灵WP和70%代森锰锌WP按药种质量比(下同)1∶200拌种;35%甲霜灵拌种剂按药种比1∶333拌种;70%敌磺钠WP按药种比1∶120拌种;30%拌种灵种衣剂按药种比1∶300包衣;15%・霜・福种衣剂按照1∶30、1∶40和1∶50的药种比分别进行包衣。各处理种子均匀摆放在直径为9cm的PDA平板上,每皿10粒,每个处理4个重复,在25～28℃温箱中12h光照�黑暗交替条件下进行培养,3～7d后记录种子带菌情况和药剂的消毒处理效果。2结果与分析2.1西瓜种子外部带菌检测结果不同品种西瓜种子外部携带的真菌差异较大(见表1),早佳8424、金花宝和兴农一号外部带菌率较高,达72%以上,种子表面携带的优势菌群主要为青霉属Penicilliumspp.、根霉属曲霉属Aspergillusspp.和镰孢属Fusariumspp.。花龙、深新一号和百龙的种Rhizopusspp.、子外部带菌率较低,为13%～14%,青霉属、镰孢属和根霉属为优势菌群。此外,郑杂9号、金花宝种子外部分别检测到丝核菌属Rhizoctoniaspp.和毛霉属Mucorspp.。火洲一号、兴农一号、特大红宝王、花龙、深新一号5个品种的种子外部均携带镰孢属,郑杂9号、特大红宝王、京欣一号和裕龙17号的种子外部均携带交链孢属Alternariaspp.。No.1吴学宏等:西瓜种子带菌检测及杀菌剂消毒处理效果41Table1Speciesandproportionofseed2bornefungionthesurfaceofwatermelonseedsVarietyofwatermelonHuozhouyihaoZaojia8424ZhengzajiuhaoJinhuabaoXingnongyihaoTJingxinyihaoHeimierhaoXinhongbaoXinongbahaoHualongShenxinyihaoYulongshiqihaoBailongNumberofculti24040404040404040404040Numberofseed2232924282016201913142112Speciesandproportionofseed2bornefungi(%)seedswithPenici2Rhi2Fusa2Asper2Alter2OtherRateof57.5a72.5a75.0a70.0a50.0b40.0b40.0b47.5b32.5c35.0c52.5b30.0c66.7.2311.1.860.675.016.7..——11.1——5.56.1——8.316.75.6—16.733.3——16.659.1—16.740.977.818.24.550.0———————12.57.67.6—22.263.650.025.062.523.1————25.025.0——18.245.5—————23.1——23.146.2—23.146.2————Note:“—”showsthatnofunguswasdetected.SameletterinthesamecolumnmeansthatthedifferenceisnotsignificantatP0.05.Thesameasinthefollowingtables.level2.2种子内部带菌检测结果结果(见表2、表3)表明,不同品种西瓜种子内部所带真菌种类差异不明显,种壳内青霉属、根霉属和曲霉属的分离频率较高,种仁上青霉属和曲霉属的分离频率较高,并且种壳的带菌率一般高于种仁的带菌率。火洲一号、早佳8424、郑杂9号、金花宝、特大红宝王、新红宝和裕龙17号7个品种的种壳内部带菌率均高于50%,而京欣一号、花龙、深新一号和百龙的种壳内部带菌率均低于30%。所有供试品种的种仁带菌率除黑蜜二号外,均低于30%,其中西农8号和花龙的种仁上未分离到真菌。在火洲一号和黑蜜二号的种壳上仅分离到交链孢属,在火洲一号、金花宝、兴农一号和裕龙17号的种仁上仅分离到青霉属,在早佳8424、特大红宝王和黑蜜二号的种仁上均分离到镰孢属和交链孢属。2.3药剂对种子的消毒效果结果(见表4)表明,福美双、代森锰锌和15%・霜・福种衣剂用于西瓜种子处理具有良好的表面消毒效果,优于多菌灵、甲霜灵、敌磺钠和次氯酸钠。经福美双和代森锰锌处理后种子带菌率小于15.0%,种子携带的真菌主要为曲霉属、青霉属和镰孢属。种衣剂按照1∶30、1∶40、1∶50的药种比包衣处理后种子的带菌率小于12.5%,种子携带的真菌主要为青霉属和曲霉属。多菌灵、甲霜灵、敌磺钠处理后种子携带的真菌主要为根霉属、交链孢属和镰孢属,霉灵、拌种灵和次氯酸钠处理后种子携带的真菌主要为根霉属、曲霉属,其次为镰孢属。42农药学学报.5VolTable2Speciesandfrequencyofinternallyseed2bornefungiofwatermelonseeds(hullofseed)VarietyofwatermelonHuozhouyihaoZaojia8424ZhengzajiuhaoJinhuabaoXingnongyihaoTJingxinyihaoHeimierhaoXinhongbaoXinongbahaoHualongShenxinyihaoYulongshiqihaoBailongNumberofculti2Numberofseed2Rateofseedswith2(%)Rhi2Asper2Alter2F2Penici2Other()402255.0b40404040404040404040402924201016201912122012.a.040.0c50.0b25.0c40.0c50.0b47.5b30.0c30.0c50.0b30.0c..4..060.09.127.6.20.012.515.060.075.070.0—30.020.0—————31.3—13.375.070.030.0—63.637.513.325.0———20.015.8———4.2————————————84.216.750.060.0—10.0———————91.716.720.066.7——————33.320.033.3—3结论与讨论1)对来自我国新疆、安徽、北京、福建等西瓜主要产区的14个西瓜主栽品种进行种子带菌检测。结果表明,不同品种之间外部携带的真菌种类差异较大,而内部寄藏的真菌种类差异不明显。西瓜种子表面携带的真菌优势菌群主要为青霉属、根霉属、曲霉属、交链孢属和镰孢属,早佳8424、金花宝和兴农一号外部带菌率较高,花龙、深新一号和百龙的种子外部带菌率较低。种子内部寄藏的真菌种类主要为青霉属、根霉属和曲霉属,并且种壳上的带菌率一般高于种仁上的带菌率。郑杂9号、金花宝种子外部分别检测到丝核菌属和毛霉属,在西农8号和花龙的种仁上未分离到真菌。2)7种杀菌剂和1种种衣剂对西瓜种子都有一定的消毒效果,其中15%・霜・福种衣剂、福美双和代森锰锌对种子表面消毒处理效果优于其他供试杀菌剂。种衣剂进行包衣处理后明显降低了种子的带菌率。内吸性杀菌剂多菌灵、霉灵、甲霜灵等对种子内部寄藏的镰孢属和交链孢属有一定的消毒效果,可将其与保护性杀菌剂福美双和代森锰锌进行复配,从