药理学实验

药理学实验药理学实验院系：生命科学系任课老师：吴雨龙任课班级：06生技、06行知生技生物技术专业实验一药理学实验基础知识1.掌握基本操作，锻炼动手、动脑能力；2.更好地掌握药理学基本理论知识；3.培养科学思维。实验一药理学实验基础知识实验目的：1实验基本要求：2•实验前:1.预习实验内容并复习相关理论知识；2.进入实验室，必须穿实验服；3.检查实验器材。•实验时:1.实验器材要妥善保管；2.实验操作按步骤进行，仔细观察实验中出现的现象，实事求是地做好记录；•实验后：1.各组同学将实验动物处死，实验台擦干净，将实验方盘送回准备室；2.值日生搞好实验室卫生，将死亡动物送至指定场所；3.书写实验报告。实验基本要求：2•实验时：3.注意节约实验药品；4.维持良好的课堂纪律。•题目•目的•原理•材料：实验动物，器材，药品•方法：用自己的语言简单扼要描述出来；•结果：要求真实、清楚；•讨论：将实验结果进行比较、分析；实验中有哪些不足之处；结果异常或失败的原因；实验报告的书写：3•随机原则：使每一实验对象都有同等的机会抽到实验组或对照组中，除处理因素外其他因素尽可能均衡一致，从而抵消非实验因素的影响。•对照原则：•组间对照：阴性对照，阳性对照，同因素不同水平对照；•自身前后对照•重复原则：实验设计的原则：4动物的选择•小白鼠：适用于需大量动物的实验，如某些药物的筛选，半数致死量的测定。也较适用于避孕药实验、抗炎镇痛药实验、中枢神经系统药实验、抗肿瘤药及抗衰老药实验等。•大白鼠：比较适用于抗炎药物实验，血压测定、利胆、利尿药实验，也可用于进行亚急性和慢性毒性实验。实验动物：5•动物的选择•豚鼠：因其对组胺敏感，并易于致敏，故常被选用于抗过敏药、平喘药和抗组胺药的实验。也常用于离体心脏、心房、肠管实验。又因它对结核敏感，常用于抗结核病药的实验。•家兔：常用于观察研究脑电生理作用，药物对小肠的作用。由于家兔体温变化敏感，也常用于体温实验，用于热原检查。•狗：狗是记录血压，呼吸最常用的大动物。还可利用狗做成胃瘘、肠瘘，以观察药物对胃肠蠕动和分泌的影响。在进行慢性毒性实验时，也常采用狗。实验动物：5实验动物的标记：6大、小鼠和白色家兔的标记常用3～5％黄色苦味酸溶液涂于皮毛上标号。常用的方法（见图1）：1号---左前腿2号---左腰部3号---左后腿4号---头部5号---正中6号---尾根部7号---右前腿8号---右腰部9号---右后腿10号---不标记•小白鼠右手提起鼠尾,左手拇指和食指捏住双耳及头部皮肤，无名指、小指和掌心夹其背部皮肤及尾部,便可将小鼠完全固定（见图2）。单手捉持，用拇指和食指抓住小鼠尾巴，用小指、无名指和手掌压住尾根部，再用腾出的拇指、食指及中指抓住鼠双耳及头部皮肤而固定（见图3）。动物的捉拿及固定方法：6•大鼠捉持和固定方法基本同小鼠，无经验者可戴上防护手套，并应动作轻柔。用右手捉住鼠尾，放在鼠笼盖上，向后轻拉鼠尾；左手掌面向鼠背，食指和中指压住鼠的头顶，拇指和无名指分别从鼠的两腋下插入，将鼠的两前肢卡住；或拽紧鼠后颈及后背皮肤即可。动物的捉拿及固定方法：6•豚鼠豚鼠性情温和不咬人，用手握住躯干即可。•家兔可用一手抓住家兔颈背部皮肤，将兔提起，另一手托其臀部，使兔呈坐位姿势（见图4-1，4-2）。在进行仰位手术操作时，可用绳带将其四肢仰位捆绑在兔手术台上。头部用兔头固定夹固定（见图5-1，5-2）。动物的捉拿及固定方法：6•小白鼠•灌胃法（i.g.）：以左手固定小鼠后，使其腹部朝上，颈部伸直。右手持配有灌胃针头的注射器，自口角插入口腔，在用灌胃器压向后方使动物口腔和食管成直线的同时，使灌胃器沿上颚滑入食道。如方法正确，应无明显障碍。若遇较大阻力或动物剧烈挣扎，必须退出重插，不得用蛮力强行插入灌胃器。否则会刺破食道或气管（见图6）。小鼠灌胃容量一般为0.1-0.3m1／10g。动物给药的方法：6•小白鼠•腹腔注射(i.p.)：以左手固定小鼠，方法同灌胃，右手持注射器，取30度-45度角将针头从下腹部向头端视动物大小刺入1-2厘米。进针部位不宜过高，刺入不宜太深，以免伤及内脏。将注射针头回退少量距离，轻轻回抽注射器，如无明显回血、回液即注入药物（见图7，图8）。小鼠腹腔注射量一般为0.1-0.3ml／l0g。动物给药的方法：6•小白鼠•肌肉注射（i.m.）：小鼠因肌肉较少，很少采用肌肉注射，若有需要可注射于股部肌肉，多选后腿上部外侧，一处注射量不超过0.1mL。动物给药的方法：6•皮下注射(s.c.)：动物皮下给药的部位主要在颈背部。固定动物后，轻轻提起皮肤，将注射针头刺入皮下。小幅度移动针头，如手指可感觉到皮肤随针头移动，表明针头可能刺入皮内。应调整角度和深度，重新插入针头。确认注射针头在皮下后，轻轻回抽，如无回血即可注入药物。用左手固定小鼠后，右手持注射器于拇指和食指捏起的皮肤处进针即可（见图9）。•小白鼠•静脉注射(i.v.)：将小鼠置于特制的固定筒内或倒置的大漏斗下，让其尾部露出。用酒精或二甲苯涂擦尾部，或将鼠尾在50℃热水中浸泡半分钟或用白炽灯烘烤使血管扩张。左手拉尾端，选择两侧尾静脉中扩张最明显的，右手持注射器将针头刺入尾静脉。当针头进入静脉时有突破感，随后的推进阻力减小，同时可能有回血。如针头未进入静脉，则无突破感，进针的阻力无改变。推入药液（见图10）。动物给药的方法：6•家兔•灌胃：需两人合作进行。一人取坐位用两腿夹持兔身，左手握家兔双耳，右手抓住两前肢。另一人将木制开口器横插家兔口内，压住舌头并固定之。取8号导尿管从开口器中部小孔插入食道。插管时如误入气管会出现动物的挣扎和呼吸困难。也可将导尿管的外端浸入水中，如有气泡吹出，表示插在气管内，此时应拔管重插。当判明导尿管在食道以内后，用注射器接通导尿管将药液推入（见图11）。动物给药的方法：6•家兔•皮下、肌肉、腹腔注射：给药方法基本上同小鼠，唯针头可稍大，给药量可稍多。皮下与肌内为0.5-1.0/mg，腹腔为1.0-5.0ml/mg。•静脉注射：将家兔置固定箱内，拨去耳壳外缘的毛，选择一条比较明显的耳缘静脉（兔耳外缘的血管为静脉，中央的血管为动脉，如图），用酒精棉球涂擦皮肤，使血管显露。用左手拇指和中指捏住兔的耳尖部，食指垫在兔耳注射处的下面，右手持注射器，将针头从近耳尖处刺入，当确认针头在血管中后，将药液推入（见图12）。动物给药的方法：6动物给药量的计算：72.实验动物给药剂量一般按mg/kg(或g/kg)计算。为了方便，大鼠和豚鼠可按每100g计算，小鼠可按每10g计算。给药剂量=药物浓度×给药体积1.药物浓度的表示方法溶液的质量（g）百分浓度（％）=—————————×100%溶液的体积（ml）3.给药容量的计算：从已知药的浓度和已知给药剂量算出相当于每1kg体重应给药的毫升数（ml）。例：小鼠体重22g，腹腔注射盐酸吗啡10mg/kg,药物浓度为0.1%,应注射多少毫升?药物浓度：0.1%=0.1g/100ml=100mg/100ml=1mg/ml给药剂量：10mg/kg=10ml/kg小鼠体重：22g=0.022kg10ml/kg×0.022kg=0.22ml或换算成ml/10g来计算较为方便：10ml/kg=0.1ml/10g。这样再计算其他小鼠的给药量就很方便。动物给药量的计算：7动物给药量的计算：7表1常用实验动物几种给药途径下的适宜给药容量动物给药途径给药途径缩写适宜给药容量小鼠灌胃ig0.1-0.3ml/10g皮下注射sc0.05-0.2ml/10g肌内注射im0.02-0.05ml/10g腹腔注射ip0.1-0.2ml/10g静脉注射iv0.1-0.2ml/10g大鼠灌胃ig1-2ml/100g皮下注射sc0.5-1ml/100g肌内注射im0.1-0.2ml/100g腹腔注射ip0.5-1ml/100g家兔灌胃ig5-20ml/kg皮下注射sc0.5-1ml/kg肌内注射im0.5-1ml/kg腹腔注射ip1-5ml/kg静脉注射iv0.2-2ml/kg动物的处死方法：8（1）颈椎脱臼法此法常用于小鼠。用左手拇指、食指或镊子用力压住小鼠的后头部，同时用右手抓住鼠尾用力向后上方牵拉，使之颈椎脱臼，鼠立即死亡。（2）空气栓塞法此法常用于家兔的处死。用注射器将空气快速注入静脉，可使动物立即死亡。动物的处死方法：8（3）击打法适用于较小的动物，如家兔、大鼠和小鼠等。提起动物的尾部，用力敲击动物头部，或用要木锤打击头部，致使动物死亡。（4）断头法此法适用于蛙、蟾蜍、小鼠和大鼠。用剪刀将动物头部剪断，由于脊髓娄离且大量出血，动物很快死亡。