中药材及饮片掺伪染色检测技术-肖凌

中药材及饮片掺伪染色中药材及饮片掺伪染色检测技术检测技术湖北省食品药品监督检验研究院省食药监督检验研究院中药检验所中药检验所肖凌2012.4主要内容¾¾中药材掺伪染色现状¾¾中药材掺伪染色现状¾染色剂的类别与结构特点¾染色剂的类别与结构特点¾中药材掺伪染色检测的技术方法¾中药材掺伪染色检测的技术方法¾掺伪染色研究实例¾掺伪染色研究实例¾通用检测方法中药材掺伪染色现状掺伪染色的主要目的改善外观、增加重量、以次充好等等。中药材掺伪染色现状•国家食品药品监督管理局已批复的掺伪染色补充检验方法和检验项目品种批准件编号检测指标蒲黄2007007总灰分、金胺O黄芩(饮片)2007008金胺O黄芩(饮片)2007008金胺O红花2007009金橙II胆南星2007010总灰分海金沙2007011总灰分细辛200712杂质穿山甲2007013总灰分穿山甲总灰分五味子2007014胭脂红、赤藓红、酸性红73朱砂(水飞)2008003808猩红血竭苏丹红猩红松香酸血竭2008004苏丹红IV、808猩红、松香酸沉香2008017松香酸乌梅2009001苋菜红、亮蓝、日落黄乌梅2009001苋菜红、亮蓝、日落黄桔梗（饮片）2009002总灰分中药材掺伪染色现状品种批准件编号主要染色物或掺伪物•国家食品药品监督管理局批复的掺伪染色补充检验方法和检验项目品种批准件编号主要染色物或掺伪物大黄药材2010001土大黄苷白鲜皮（饮片）2010002镁盐和铝盐、总灰分黄柏（饮片）2010003金胺O黄连（饮片）2010004金胺O、总灰分桔梗（饮片）2010005镁盐和铝盐、总灰分延胡索2010006金胺O猪苓（饮片）201000镁盐和铝盐总灰分猪苓（饮片）2010007镁盐和铝盐、总灰分西红花2011001金胺O、新品红、柠檬黄、胭脂红青黛2011002孔雀石绿青黛2011002孔雀石绿人工牛黄2011003胭脂红、金胺O、金橙Ⅱ、炽灼残渣冬虫夏草2011004苋菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝、808猩红乳香2011005松香酸没药2011006松香酸中药材掺伪染色现状染色成分检出品种胭脂红西红花、红花、山茱萸柠檬黄西红花、红花、乌梅、全蝎酸性红73红花、茜草、朱砂金橙Ⅱ红花人工牛黄金橙Ⅱ红花、人工牛黄金胺O蒲黄、黄芩、黄连、黄柏、延胡索、西红花、人工牛黄新品红西红花苋菜红乌梅、枸杞子、酸枣仁、冬虫夏草赤藓红酸枣仁、乌梅808猩红血竭、朱砂、中成药苏丹红I血竭苏丹红IV血竭、中成药孔雀石绿青黛孔雀石绿青黛亮蓝冬虫夏草、水蛭、乌梅日落黄冬虫夏草、水蛭、乌梅、枸杞子诱乌梅枸诱惑红乌梅、枸杞子、酸枣仁碱性橙松花粉中药材掺伪染色现状品种可能掺伪物检查方法海金沙黄泥粉浸泡、总灰分地龙、水蛭、全蝎、土鳖虫、海马掺入泥沙矿物、金属等增重切开观察性状、浸泡猪苓硫酸镁浸泡、无机盐鉴别反应穿山甲硫酸镁、明矾浸泡、无机盐鉴别反应沉香其它木材＋树脂显微（木间韧皮部）檀香其它木材＋香精TLC鉴别紫河车动物胎盘+淀粉增重组织切片紫河车动物胎盘+淀粉增重组织切片龙血竭松香＋铁红粉TLC检查青黛矿物＋色素TLC鉴别哈蟆油牛蛙混充较多性状浸泡哈蟆油牛蛙混充较多性状、浸泡菟丝子其他植物的种子或沙粒混充性状、浸泡大黄非正品大黄土大黄苷检验五味子南五味子染色混充性状西洋参人参TLC鉴别冰片樟脑、明矾、蔗糖、芒硝气味、GC或TLC鉴别茜草其它品种混充性状山茱萸胭脂红、赤藓红、酸性红73染色TLC鉴别染色剂的类别与结构特点¾食用色素（水溶性色素）¾化工染料纺织品着色被纤维吸附、固着¾有机颜料非纺织品着色靠树脂胶黏剂于着¾有机颜料非纺织品着色靠树脂、胶黏剂于着色物结合色物结合¾无机或矿物颜料染色剂的类别——食用色素•天然食用色素：焦糖色素、红曲红、高梁红、栀子黄、萝卜红叶绿素铜钠盐胡萝卜素可可壳色姜黄等萝卜红、叶绿素铜钠盐、胡萝卜素、可可壳色、姜黄等•合成色素：我国食品添加剂准许使用的合成色素有胭脂红、苋菜红、日落黄、赤藓红、柠檬黄、新红、靛蓝、亮蓝、二氧化钛（白色素）等。苋菜红亮蓝赤藓红染色剂的类别——化工染料偶氮染料偶氮染料苏丹红IV金橙II苏丹红金橙II染色剂的类别——化工染料三芳基甲烷类染料金胺O孔雀石绿金胺O孔雀石绿染色剂的危害¾偶氮染料致癌性过敏性¾蒽醌类染料癌诱变性皮肤过敏性¾蒽醌类染料癌诱变性皮肤过敏性¾三芳基甲烷类染料致癌对眼睛的刺激金胺Oz其可作为抗酸性细菌荧光染色、蝾螈活体染色、植物组织染色；麻、纸、皮革、脂肪、人造丝、棉织品等染色。z对皮肤黏膜有轻度刺激可引起结膜炎皮炎和上呼吸金胺Oz对皮肤黏膜有轻度刺激，可引起结膜炎、皮炎和上呼吸道刺激症状，人接触或者吸入都会引起中毒；作为芳香胺类染料，金胺O与其代谢产物具有致突变性，致癌性和其他毒性毒性。z其作为水产养殖业中的杀虫剂和杀菌剂许多国家均禁止将其作为人类食用鱼的兽药使用。孔雀石绿其作为人类食用鱼的兽药使用z遗传毒性，可增加了肝细胞的突变频率。生殖和发育毒性，可导致新生儿骨骼、心脏、肝和肾发育异常。致癌性，表现为诱发甲状腺肿瘤肝肿瘤和乳腺肿瘤的发生等可引起肝肾诱发甲状腺肿瘤、肝肿瘤和乳腺肿瘤的发生等。可引起肝、肾、心脏、脾、皮肤、眼睛、肺等多器官慢性毒性。中药材掺伪染色检测的技术¾经验鉴别、理化鉴别、显微鉴别——快速筛查¾经验鉴别、理化鉴别、显微鉴别快速筛查¾薄层色谱法——定性鉴别、常规检测薄层色谱法定性别常规检测¾高效液相色谱法——定性鉴别、常规检测¾液-质联用法——结构鉴定、方法验证中药材染色检测实例—红花z理化鉴别、薄层检查734394042ABCDEFGHIJKL对照金橙II的检测硅胶G薄层板硅胶G薄层板展开剂：氯仿-甲醇-冰乙酸(7：1：2)•国家食品药品监督管理局补充检验方法2007009•国家食品药品监督管理局补充检验方法2007009中药材染色检测实例—红花z高效液相色谱法色谱法金橙II的HPLC检测金橙II的HPLC检测色谱柱：DiamonsilC18流动相：乙腈－0.025mol/L磷酸二氢钾溶液（含02%三乙胺并用磷酸调pH值为30）(4060)0.2%三乙胺，并用磷酸调pH值为3.0）(40：60)检测波长：484nm中药材染色检测实例—红花DADES-金橙IIz液相-质谱联用法ES+联用法DADDADES-红花药材ES+中药材染色检测实例—蒲黄蒲黄掺伪蒲黄伪蒲黄蒲黄掺伪蒲黄伪蒲黄日光下检视紫外光灯（365nm）下检视品名性状显微鉴别荧光试验碳酸盐试验蒲黄体轻。黄色，色泽均匀、细腻或较粗糙。用手捻之有滑腻感。可见大量花粉粒，少量花粉囊内壁细胞等非药用部位。无荧光无气泡掺伪品体较重。黄色，较粗糙。手感发涩。除花粉粒外，还可见到较多的不规则矿物颗粒。有金黄色或亮黄绿色荧光有气泡伪品体重。黄色，色泽不自然，特别鲜艳。手感发无花粉粒，全部为不规则矿物颗粒。有明显金黄色或亮黄绿有大量气泡涩。色荧光中药材染色检测实例—蒲黄z显微鉴别非腺毛、晶体纤维组织正品花粉粒众多伪品少见或不见花粉粒中药材染色检测实例—蒲黄z薄层检查金胺O的薄层色谱检测硅胶G硅胶G展开剂：二氯甲烷－乙酸乙酯－甲醇—氨水（4：5：1：1）的下层溶液•国家食品药品监督管理局补充检验方法2007007•国家食品药品监督管理局补充检验方法2007007中药材染色检测实例—蒲黄z高效液相z高效液相色谱法金胺O的HPLC检测色谱柱：DiamonsilC18流动相：乙腈－0.025mol/L磷酸二氢钾溶液（含流动相：乙腈0.025mol/L磷酸二氢钾溶液（含0.2%三乙胺，并用磷酸调pH值3.0）（35：65）检测波长:432nm中药材染色检测实例—蒲黄金胺O对照试剂色谱图及DAD光谱图蒲黄药材阳性样品色谱图及DAD光谱图中药材染色检测实例—蒲黄离子源ESI（+）金胺O对照试剂质谱图蒲黄阳性样品质谱图z液相-质谱联用法中药材染色检测实例—乌梅复合色素染色复合色素染色乌梅染色物：苋菜红、亮蓝、日落黄硅胶G板硅胶G板展开剂：乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-氨水-水（1：3：3：1：1）可见光检视国家食品药品监督管理局补充检验方法•国家食品药品监督管理局补充检验方法2009001中药材染色检测实例—乌梅乌梅染色物HPLC检测WatersC18，5μm，250x4.6mm；甲醇-0.02mol/L乙酸铵（冰乙酸调pH4.0），梯度洗脱500检测苋菜红和日落黄500nm检测苋菜红和日落黄，630nm检测亮蓝。中药材染色检测实例—延胡索紫外光灯365nm下检视TLC检查TLC检查•国家食品药品监督管理局补充检验方法2010006中药材染色检测实例—延胡索z快速理化鉴别（仙桃所）样品，加适量70%乙醇，强力振摇，静置，取上清液，用玻棒沾取少许，点于圆形滤纸片上，吹风机吹干，置紫外光（365nm）灯下观察。中药材染色检测实例—延胡索延胡索伪品——山药蛋蛋染色金胺O中药材染色检测实例—山茱萸实z薄层检查（恩施所）山茱萸胭脂红染色山茱萸酸性红73染色山茱萸赤藓红染色山茱萸染色山茱萸与山茱萸外形极相似，其主要区别为红色更深（用酸性红和胭脂红染色较赤藓红染色颜色更深），较有光泽，质油润，果核及果核碎片较多，红色，用70%乙醇浸泡，醇液迅速被染成红色液迅速被染成红色。中药材染色检测实例—山茱萸实酸性红73赤藓红胭脂红三种对照品硅胶G薄层板乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-氨水-水（1：3：3：1：1）中药材掺伪染色检测实例—血竭同时检测染色物、掺伪物同时检测染色物、掺伪物伪品血竭样品用松香、铁红粉、高岭土、染料等伪造。用松香、铁红粉、高岭土、染料等伪造。中药材掺伪染色检测实例—血竭苏丹红IV猩红808松香酸松香酸日光检视喷10％硫酸乙醇，加热后日光检视硅胶Ｇ薄层板硅胶Ｇ薄层板以环己烷-乙酸乙酯（9：1）为展开剂，展开，晾干，再以石油醚（60~90℃）-乙酸乙酯-冰乙酸（9：1：0.1）为展开剂，展开。•国家食品药品监督管理局补充检验方法2008004中药材增重掺伪检测实例—猪苓增重掺伪（孝感所）正常样品增重样品“加重粉”为硫酸镁，其样品外观性状中整体看上去灰白色，外表面黑色附一层白色粉末。切面浅黄棕色附白色粉末，手捏滑腻感，体沉质重，坚实，难折断，气微味咸，具碱味。敲击时有清脆响声。中药材掺伪染色检测实例—五味子性状鉴别五味子五味子南五味子五味子伪品－山葡萄中药材掺伪染色检测实例—五味子染色薄层检查赤藓红酸性红73未染色染色样品胭脂红•国家食品药品监督管理局补充检验方法2007014•国家食品药品监督管理局补充检验方法2007014中药材掺伪染色检测实例—朱砂•以猩红808加矿物粉、代赭石等伪充。性状、TLC检查猩红808•国家食品药品监督管理局补充检验方法2008003•国家食品药品监督管理局补充检验方法2008003中药材掺伪检测实例—大黄实黄掌叶大黄中药材掺伪检测实例—大黄实黄药用大黄中药材掺伪检测实例—大黄华北大黄华北大黄藏边大黄鉴别共同要点：伪品大黄断面的荧光常呈蓝紫色，而正品大河套大黄的荧光常呈蓝紫色，而正品大黄断面则无此现象中药材掺伪检测实例—大黄实黄大黄真伪鉴别指标成分大黄真伪鉴别指标成分品品种种正品大黄正品大黄伪品大黄伪品大黄品品种种正品大黄正品大黄伪品大黄伪品大黄主要成分蒽醌衍生物不含土大黄苷蒽醌衍生物为正品的1/30含土大黄苷不含大黄苷含土大黄苷作用游离型蒽醌：抗菌结合型蒽醌：泻下不得作大黄药用工业染料或兽药中药材掺伪检测实例—大黄实黄中药材掺伪检测实例—大黄实黄粉末粉末0.2g0.2g粉末粉末gg甲醇甲醇2ml,2ml,温浸温浸30'30'10μl10μl点于滤纸上点于滤纸上以以4545％乙醇展开％乙醇展开放置放置10min10minS1234紫外光灯紫外光灯(365nm)(365nm)下检视下检视放置放置10min10minS:土大黄苷4:伪品大黄1-3:3个正品大黄S1234不得显持久的不得显持久的亮紫色荧光亮紫色荧光究竟什么样算亮紫色荧光斑点？究竟什么样算亮紫色荧光斑点？斑点荧光持续多久算持久？？斑点荧光持续多久算持久？？亮紫色荧光亮紫色荧光斑点荧光持续多久算持久？