24结核分枝杆菌

病原生物学教研室DepartmentofpathogenicBiologyofGannanMedicalUniversity医学微生物学MedicalMicrobiology第十三章呼吸道感染细菌传播途径：呼吸道传播包括：结核分枝菌、白喉杆菌、嗜肺军团菌、百日咳鲍特菌、流感嗜血杆菌及肺炎克雷伯菌等第一节结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis)一类细长弯曲的杆菌，因有分枝生长的趋势而命名主要特点–细长弯曲，分枝状生长–细胞壁含有大量脂质（分枝菌酸）–常用抗酸染色鉴定，呈抗酸染色阳性–引起疾病都呈慢性，并伴肉芽肿分类–结核分枝杆菌复合群–非结核分枝杆菌–麻风分枝杆菌分枝杆菌属概述抗酸染色由于细菌细胞壁中含大量脂质，一般不易着色，若经加温或延长染色时间而着色后又能抵抗强脱色剂盐酸酒精的脱色，故又称抗酸杆菌(acid-fastbacilli)抗酸染色法(acid-faststain)：以5％石炭酸复红加温染色，再用3％盐酸酒精脱色，然后用美蓝复染，则分枝杆菌呈红色(+)，其他细菌和背景物质为蓝色(-)。结核分枝杆菌俗称结核杆菌，引起人类结核病致病菌主要为结核分枝杆菌（M.tuberculosis)、牛分枝杆菌(M.bovis)世界上1/3人感染，70%在亚洲世界防治结核病日：3月24日流行病学–全球总疫情20亿人口感染了结核菌，现症结核病人2000万，每年新发病人数800－1000万，每年300万人死于结核病。–我国疫情现有活动性肺结核病人500万人，传染性肺结核病人200万人，每年因结核病死亡25万人。形态与染色细长略带弯曲，分枝状，无芽胞、鞭毛、和荚膜，抗酸染色阳性L型–Much颗粒培养特点–专性需氧–生长缓慢–营养要求高，常用罗氏培养基生长现象–液体：表面生长（菌膜）–固体：颗粒、结节、花菜状菌落，乳白或米黄，不透明生化反应不发酵糖类触酶试验阳性，而热触酶试验阴性抵抗力四不怕–干燥–酸（3%HCl或6%H2SO4)或碱（4%NaOH)有抵抗力–碱性染料–青霉素等抗生素四怕–乙醇–湿热–紫外线–抗痨药物（链霉素、异烟肼、利福平等）变异性形态结构变异：–结核杆菌的L型：颗粒状、丝状、Much颗粒毒力变异：–卡介苗BCG：Calmette和Guérin将牛分枝杆菌经13年230次传代而获得的减毒活疫苗株耐药性变异：–耐异烟肼及其他抗结核药物的结核菌株日益增多致病物质二、致病性脂质索状因子（破坏细胞，引起肉芽肿）磷脂（形成结核结节）硫酸脑苷脂（抑制吞噬体与溶酶体结合）蜡质D（引起迟发性过敏反应）蛋白质引起迟发性过敏反应多糖所致疾病感染方式–呼吸道、消化道或皮肤损伤侵入机体所致疾病–结核病，以肺结核常见肺部感染原发感染：外源性感染–多发生于儿童（无免疫力）–原发综合征(原发病灶、淋巴管炎、肺门淋巴肿大等)–形成结核结节（即结核肉芽肿），少数病灶扩散，引起全身TB–转归原发后感染：外或内源性感染–多见成人–病灶局限引起局部TB、开放性TB（反应剧烈，干酪性坏死、空洞）吞噬细胞内繁殖（渗出性炎症）原发性感染原发性感染见于学龄儿童及未受过感染的成人。结核分枝杆菌肺泡全身性粟粒性结核结核结节淋巴结病灶逐渐纤维化和钙化原发性综合症吞噬细胞肺外感染进入血液循环引起肺内、外播散，如脑、肾、肠、腹腔大多与结核分枝杆菌L型有关三、免疫性机体抗结核免疫特点：传染、免疫、超敏反应共存免疫机制主要是以T细胞为主的细胞免疫属于感染免疫(infectionimmunity)，又称有菌免疫免疫与超敏反应细胞免疫为主,迟发型超敏反应同时存在郭霍现象–注射结核杆菌于豚鼠皮下初次注射局部反应小全身扩散无免疫无超敏反应再次注射局部反应大不扩散有免疫有超敏反应以前感染过或免疫豚鼠正常豚鼠24-48小时10-14天局部红肿、浅溃疡局部红肿、溃疡不扩散，脱落后自行愈合坏死，经久不愈有毒TB菌全身扩散皮下郭霍现象结核菌素试验（OT试验）是应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核分枝杆菌是否能引起迟发型超敏反应（Ⅳ型变态反应）的一种试验方法–前臂皮内注射PPD5单位意义–48～72h红肿硬结超过5mm,阳性，有免疫力–阴性，无免疫力（四种情况除外：1，2，3，4）应用选择卡介苗接种对象和测定卡介苗接种后的免疫效果。结核菌素试验阴性者应接种或补种卡介苗在未接种卡介苗的人群中作结核杆菌感染的流行病学调查,了解人群自然感染率作为婴幼儿(尚未接种过卡介苗者)结核病的辅助诊断测定肿瘤患者的细胞免疫功能四、微生物学检查法标本处理：浓缩集菌(氢氧化钠处理）直接镜检：抗酸染色分离培养：培养基、时间（2~4周后见结果）动物试验：豚鼠等快速诊断：PCR等痰液等四、防治原则预防–一般性预防：卫生宣传、提高机体抵抗力–特异性预防：发现和治疗痰菌阳性者新生儿接种卡介苗治疗–一般治疗：合理营养，注意休息–抗结核药物链霉素、异烟肼、利福平等治疗原则：早期、联合、适量、规律、分阶段治疗和坚持全程第二节非结核分枝杆菌(nontuberculosismycobacteria)概念结核分枝杆菌、牛分枝杆菌与麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌对酸、碱比较敏感对常用的抗结核菌药物较耐受生长温度不如结核分枝杆菌严格多存在于环境中、为条件致病菌可引起结核样病变而受到关注抗原与结核分枝杆菌有交叉特性分类第Ⅰ组：光产色菌–堪萨斯分枝杆菌，引起人类肺结核样病变第Ⅱ组：暗产色菌–瘰疠分枝杆菌，引起儿童淋巴结炎第Ⅲ组：不产色菌–鸟-胞内分枝杆菌，可引起结核样病变第Ⅳ组：迅速生长菌–耻垢分枝杆菌鉴别有否致病性可用抗煮沸试验加以区别L型第三节麻风分枝杆菌(Mycobacterium.leprae)俗称麻风杆菌，引起麻风，是一种慢性传染病流行广泛，主要分布在亚、非和拉丁美洲生物学性状形态、染色与结核分枝杆菌相似麻风分枝杆菌是一种典型胞内菌–麻风细胞体外人工培养至今仍未成功犰狳致病性与免疫性传播方式–呼吸道–也可通过接触传染发病慢,病程长麻风的免疫主要是靠细胞免疫细菌主要侵犯神经、皮肤微生物学检查法显微镜检查可从患者鼻粘膜或皮损处取材，用抗酸性染色后检查一般瘤型和界线类患者标本中可找到细菌在细胞内存在，有诊断意义防治原则无特异性预防方法，隔离早发现，早治疗目前多采用二三种药联合治疗第一节白喉棒状杆菌(Corynebacteriumdiphtheriae)概述革兰阳性一端或两端膨大呈棒状，无荚膜、无鞭毛，不产生芽胞多为条件致病菌致病菌：白喉棒状杆菌形态与染色菌体细长微弯，一端或两端膨大呈棒状,常排列呈V、L形Albert染色，可出现异染颗粒metachromaticgranule，在鉴定时有重要意义一、生物学性状培养特性营养要求较高吕氏血清斜面（含有凝固血清）上生长迅速，异染颗粒明显选择鉴别培养基–亚碲酸钾血平板(黑色菌落)抵抗力对湿热抵抗力弱抗寒冷和干燥对青霉素、氯霉素、红霉素敏感二、致病性致病物质白喉外毒素：β棒状杆菌噬菌体带有编码外毒素的tox基因,在溶原阶段基因整合到染色体上即可产生–A亚单位和B亚单位–B亚单位有结合和转位功能–A亚单位上有1个催化区作用靶：心肌和神经细胞作用机制A亚单位可使细胞延伸因子-2（EF-2）灭活，影响蛋白质的合成。作用特点–毒性作用大，1分子能杀一个细胞–多种细胞，特别心肌、神经细胞均有毒素受体–肿瘤细胞对此毒素特别敏感所致疾病白喉--急性呼吸道传染病传染源：患者及带菌者传播途径：飞沫或污染临床表现–细菌--------上呼吸道粘膜，生长繁殖，产生毒素,–细菌与毒素共同作用引起局部症状：炎症，坏死，纤维蛋白渗出假膜——窒息–毒素入血引起全身中毒症状外周N---N炎：膈肌麻痹--呼吸困难声带麻痹--声音嘶哑软颌麻痹--吞咽困难心肌---心肌炎所致疾病---白喉白喉棒状杆菌（鼻咽腔）飞沫污染物品鼻咽喉气管局部细菌和毒素的作用灰白色假膜（渗出的纤维素和白细胞及坏死组织凝固在一起）粘膜水肿及假膜脱落，引起呼吸道阻塞，甚至窒息死亡。外毒素入血毒血症心肌肝肾上腺外周神经内脏出血心肌炎软腭麻痹声嘶肾上腺功能障碍（2－7d潜伏期）白喉假膜抗毒素免疫感染后机体可获得牢固的免疫力机体还可通过其它方式获得免疫力：–六月以下婴儿---------母亲–成人---------------------隐性感染、疫苗易感者–1~5岁儿童–成人--也有可能三、免疫性锡克试验(Schicktest)原理：毒素抗毒素中和反应方法：注射毒素（毒性、蛋白质）试验加热破坏的毒素（无毒、蛋白质）对照结果：48小时观察结果，有红肿阳性反应无免疫力无红肿阴性反应有免疫力应用：检查机体对白喉的免疫力预防接种前的筛选与接种后效果观察流行病学调查微生物学检查法标本直接涂片镜检—形态，异染颗粒，分离培养--吕氏血清斜面，亚碲酸钾平板毒力鉴定—动物试验，Elek平板毒力实验Elek平板试验结果ElekTest沉淀线(阳性)含白喉抗毒素滤纸片白喉杆菌菌苔防治原则-与破伤风类似预防–人工主动免疫：注射白喉类毒素（白百破三联疫苗）–人工被动免疫：注射白喉抗毒素–药物预防：如注射青霉素或口服红霉素治疗–白喉抗毒素---皮肤试验、早期使用–抗生素第二节其他棒状杆菌大多不产生外毒素很少有异染颗粒大多正常寄生于人体，为条件致病菌