10+肠道感染性细菌.

微生物学教研室夏克栋第10章肠杆菌科第10章肠杆菌科寄居人和动物肠道中一大群生物学性状相似的革兰阴性杆菌包括：致病菌：伤寒沙门菌、志贺菌等机会致病菌：大肠杆菌由正常菌群转变来的致病菌：致病性大肠杆菌1.形态结构相似2.培养要求不高3.生化反应活泼4.抗原结构复杂5.抵抗力不强6.易发生变异共同特性1.形态结构相似中等大小G-杆菌无芽孢大多有菌毛、鞭毛少数有荚膜生化反应：常用SS培养基（选择培养基）分离细菌乳糖发酵试验SS培养基非致病菌(大肠）+有色大菌落(分解乳糖)致病菌(伤寒、痢疾）-无色透明小菌落(不分解乳糖)＊SS培养基:基础培养基,乳糖(底物),胆盐、煌绿(抑制非致病菌),中性红(指示剂)乳糖发酵试验：初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌SS培养基Ｏ抗原：耐热性菌体抗原；细胞壁脂多糖，稳定，属特异性，刺激机体产生IgM抗体Ｈ抗原：鞭毛蛋白，不耐热，失去后运动消失，刺激机体产生IgG抗体荚膜抗原（Ｋ抗原）：多糖类物质，位于Ｏ抗原外围。4抗原结构复杂6.易变异溶原性转换生化反应变异通过引起耐药性变异毒力变异转导接合H-O抗原及S-R菌落变异等第一节埃希菌属有6个种，其中普通大肠埃希菌（E.coli）最常见，重要的一个菌种肠道中重要的正常菌群，出生后数小时就进入肠道，终生伴随，为宿主提供具有营养作用的合成代谢产物免疫力下降或侵入到肠道外组织器官，成为条件致病菌，引起肠道外感染有一些血清型大肠埃希菌具有致病性作为水源、食物粪便污染的指标一、生物学性状G-菌多有周鞭毛，普通菌毛、性菌毛致病性与菌毛有关培养特性与生化反应营养要求不高，普通平板，灰白色、圆形、光滑、中等大小的菌落；液体培养呈浑浊生长生化反应活波，IMViC实验结果＋＋－－发酵葡萄糖等，产酸产气分解乳糖、硫化氢阴性、动力阳性，可与沙门菌、志贺菌区别主要有O、H、K抗原，血清型分型的基础Ｏ抗原血清学分型超过170种Ｈ抗原鞭毛抗原56种Ｋ抗原Ｏ抗原外层菌毛抗原／荚膜抗原100种以上抗原结构二、致病性黏附素:黏附在泌尿道和肠道细胞１、致病物质志贺毒素Ⅰ和Ⅱ外毒素不耐热肠毒素Ⅰ和Ⅱ耐热肠毒素a和b溶血素A其他：内毒素、III型分泌系统等肠道外感染：---普通型大肠埃希菌（E.coli）：化脓性感染和泌尿道感染最常见，属于内源性感染（1）泌尿道感染（2）败血症（3）新生儿脑膜炎胃肠炎：致病性大肠埃希菌引起，属外源性感染，食入污染的食物和水，主要有五种类型２、所致疾病五种引起胃肠炎的大肠埃希菌1、肠产毒性大肠杆菌(enterotoxigenicE.coli,ETEC)婴幼儿和旅游者腹泻的主要病原菌，症状从轻度腹泻到严重霍乱样腹泻致病物质肠毒素：不耐热肠毒素(LT)LT-Ⅰ主要致病物质耐热肠毒素(ST)STa致病定植因子(菌毛）：黏附作用，失去定植因子的菌株不引起腹泻肠毒素（LT、ST）的作用机制LT：B亚单位与神经节苷脂GM1结合A亚单位穿膜活化腺苷酸环化酶ATP转化成cAMP，cAMP升高水、电解质过度分泌，腹泻LT与霍乱肠毒素氨基酸同源性达75%一个A亚单位ST的中间产物为cGMP五个B亚单位2.肠侵袭性大肠埃希菌(enteroinvasiveE.coli,EIEC)似菌痢，脓血便，有里急后重致病机理不产生肠毒素靠侵袭力侵袭结肠粘膜上皮细胞，生长繁殖导致组织破坏，引起炎症、溃疡血性黏液便3.肠致病型大肠埃希菌(enteropathogenicE.coli,EPEC)婴幼儿腹泻的主要病原菌致病机理不产生毒素，靠粘附于微绒毛，大量繁殖破坏肠粘膜微绒毛黏膜上皮细胞结构和功能受损，导致腹泻4、肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhagicE.coli,EHEC)出血性结肠炎和溶血性尿毒综合征的病原污染食品是EHEC感染的重要传染源，如牛肉致病物质：菌毛和毒素志贺毒素：细胞毒，干扰蛋白质合成，破坏肠绒毛选择性破坏肾小球内皮细胞---急性肾衰临床表现:轻重不一10%为十岁以下患儿，有严重并发症(急性肾衰竭)，死亡率高重要血清型：O157：H75、肠集聚型大肠杆菌(enteroaggregativeE.coli,EAEC)引起婴儿持续性腹泻、脱水、偶有血便致病物质：质粒编码的蛋白致病机制：介导细菌聚集性黏附与肠粘膜细胞，阻止液体的重吸收，导致腹泻肠道感染1）肠产毒型大肠杆菌（ETEC）2）肠致病型大肠杆菌（EPEC）3）肠侵袭型大肠杆菌（EIEC）4）肠出血型大肠杆菌（EHEC）5）肠聚集型大肠杆菌（EAEC）三、微生物检查1.标本：肠外感染尿、血等腹泻粪便2.分离培养与鉴定：涂片染色镜检（选择培养基）分离培养生化鉴定*尿路感染需计数细菌总数，＞10万/mL在环境和食品卫生学上，常被用作粪便污染的检测指标≤3个大肠菌群/1L饮水≤5个大肠菌群/100ml瓶装汽水、果汁卫生学指标大肠菌群数37度24h内发酵产酸产气的肠道杆菌数我国的卫生标准：防治治疗：早期纠正体液平衡，抗生素治疗预防：防止粪便污染切断粪-口传播途径疫苗：ETEC的菌毛抗原是关键抗原，动物实验已获成功另：合成ST与LT非毒性Ｂ亚单位，疫苗正在研制中G-菌，球杆状又称痢疾杆菌是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌第二节志贺菌属能分解葡萄糖，产酸不产气，不分解乳糖,除宋内志贺菌G-短小杆菌，无鞭毛，无芽孢，有菌毛生化反应低于其他肠道杆菌，对酸和一般消毒剂敏感形态对理化因素的抵抗力一.生物学性状－－区别于其他肠道杆菌SS培养基上为无色透明菌落动力实验抗原与分类：有K、O抗原，无H抗原根据O抗原分类菌种群型亚型痢疾志贺菌A1－10福氏志贺菌B1－6，X，Y变种鲍氏志贺菌C1－18宋内志贺菌D1致病性侵袭力：菌毛—粘附肠粘膜M细胞，波及临近细胞，生长繁殖---细胞坏死—脓血便加重局部和全身症状外毒素（A群1型）细胞毒，与内毒素协同作用致病物质内毒素作用于肠壁通透性增加粘膜炎症溃疡肠壁植物神经内毒素血症脓血便腹痛腹泻、里急后重所致疾病特点：病灶局限于结肠粘膜，一般不入血病后免疫期短，也不巩固所致疾病：细菌性痢疾传染源:患者和带菌者传播途径：粪—口传播急性细菌性痢疾急性典型：发热、腹痛、脓血粘液便、里急后重急性非典型：易误诊，导致带菌和慢性中毒性痢疾：小儿，全身中毒症状（严重，死亡率高）慢性细菌性痢疾：病程迁移两个月以上带菌者：细菌定植在结肠，无症状，传染源所致疾病微生物学检查及时送/暂用30%甘油缓冲水保存SS平板（无色透明小菌落）血清学反应（玻片凝集）明确诊断分离培养新鲜脓血便/肛拭双糖培养基（生化反应）快速诊断荧光菌球试验协同凝集试验预防：口服减毒活疫苗治疗：多种抗生素可选择但很易引起耐药性防治原则及时治疗患者，切断传播途径等加强卫生管理其中许多为人畜共患病第三节沙门菌属（Salmonella）一大群寄生在人与动物肠道中的G-杆菌菌群菌型甚多，仅少数对人致病引起肠热症的伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌等；引起食物中毒的鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌生物学性状1、形态与染色G-杆菌有周鞭毛;无芽胞、荚膜2、培养特性与生化反应普通平板无色半透明S型菌落，SS平板无色菌落生化反应：不发酵乳糖和蔗糖肠道致病菌分离鉴定依据四类肠道杆菌的生化反应:代表种动力葡萄糖乳糖靛基质H2S尿素酶埃希菌属大肠埃希菌++++--志贺菌属痢疾志贺菌-+-+/---沙门菌属伤寒沙门菌++---/+-变形杆菌属变形杆菌++-+++3、抗原构造（1）O抗原：1、脂多糖，耐热2、可刺激机体产生IgM（2）H抗原：1、蛋白质，不耐热2、可刺激机体产生IgG（3）Vi抗原（强毒株），表面抗原：抗吞噬4、抵抗力不强，对热及一般消毒剂敏感对氯霉素极敏感致病性侵袭力：Ａ.菌毛黏附并侵入M细胞，吞噬细胞内生长繁殖Ｂ.耐酸应答基因：耐胃酸C.Vi抗原：抗吞噬内毒素：沙门菌重要的毒力因子----内毒素效应激活补体----产生炎症反应肠毒素：如鼠伤寒沙门菌可产生肠毒素1.致病物质2、所致疾病1.肠热症:由伤寒沙门菌引起的伤寒、甲型副伤寒沙门菌等引起的副伤寒2.胃肠炎(食物中毒)3.败血症4.无症状带菌者胆囊----肠道----粪排菌皮肤----血栓出血--玫瑰疹肾-----尿肝、脾-----肿大骨髓伤寒和副伤寒的致病过程伤寒和副伤寒杆菌小肠肠系膜淋巴结肠壁固有层淋巴结（致敏）进入血液再次入血液第一次菌血症第二次菌血症(发热、不适、全身酸痛)高热相对缓脉皮疹肝脾肿大白细胞减少经口经胸导管细菌大量繁殖胆囊中排出体外（粪便）超敏反应:引起肠壁淋巴结坏死肠出血、穿孔（注意饮食）肾脏随尿排出典型的伤寒病程3－4周，症状相对较重恢复期带菌者排菌3周－3月长期带菌者1年以上重要传染源（2）急性胃肠炎（食物中毒）最常见沙门菌感染，常为集体食物中毒食用由鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌污染食物引起发热、恶心、呕吐、腹痛、水样腹泻血培养阴性，粪便培养阳性（3）沙门菌败血症多见于儿童和免疫功能低下者血培养阳性，粪便培养阴性高热、寒战、厌食、贫血，菌可随血流导致脑膜炎、骨髓炎、胆囊炎、心内膜炎（4）无症状带菌者1％－５％的患者症状消失后１年仍可在粪便中检出沙门菌细菌贮留在胆囊内3、免疫性依靠细胞免疫，增强了巨噬细胞杀灭细菌的功能；恢复机制靠细胞免疫体液免疫（sIgA、抗O、抗Vi）：只能对胞外细菌有杀死或溶菌作用可获一定免疫力，黏膜抗体形成局部免疫三、微生物学检查1、沙门菌的分离鉴定第1周血液第2周粪便第3周尿液第1～3周骨髓肠热症胃肠炎败血症粪便、呕吐物、可疑食物血液（1）标本（2）分离培养和鉴定血液、骨髓穿刺液肉汤基（增菌培养）粪便、尿液、呕吐物选择培养基双糖铁培养基SS琼脂平板（分离培养）（纯分离及初步鉴定）血清学鉴定系列生化反应动力试验微生物学检查血清学诊断1、肥达试验（Widal试验）原理：用已知伤寒沙门菌O、H抗原，以及引起副伤寒的甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌的H抗原与受检血清作凝集试验，测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。用途：辅助诊断伤寒、副伤寒肥达试验的结果判断考虑正常人群抗体水平正常值：伤寒Ｏ≥1/80Ｈ≥1/160有诊断价值副伤寒Ｈ≥1/80动态观察：恢复期效价增加≥4倍OIgM,出现早，维持时间短HIgG,出现迟，维持时间长–O高H高肠热症可能性大–O低H低排除–O高H低感染早期或有交叉反应的其它沙门菌感染–O低H高预防接种或非特异性回忆反应玻片凝集实验1.结果解释必须结合临床表现、病程、病史、地区流行病学等2.其他：例外，整个病程中肥达试验结果无变化使用抗生素免疫功能低下四、防治原则加强卫生管理早发现，及时治疗药物治疗：环丙沙星疫苗：伤寒Vi荚膜多糖疫苗弧菌属菌体短小、弯曲呈弧状或逗点状G-菌，单鞭毛分布广泛，水中居多，大多数是非致病菌致病菌主要是霍乱弧菌和副溶血弧菌霍乱食物中毒第一节霍乱弧菌引起烈性传染病———霍乱曾发生过7次世界性霍乱大流行，病原体均为O1群，前6次——古典生物型；第7次是Eltor生物型。1992年出现新流行菌株O139，首次由非O1群引起，是目前在东南亚各国流行的主要病原菌。一、生物学性状1、形态与染色液体中运动非常活泼呈穿梭样涂片中排列整齐呈鱼群状G-,弧型或逗点状，有菌毛，单鞭毛2、培养特性与生化反应营养要求不高，耐碱不耐酸在pH8.8～9.0的碱性蛋白胨水/碱性琼脂平板上生长良好无盐环境生长，其他致病性弧菌否过氧化氢酶阳性吲哚实验阳性3、抗原构造与分型Ｏ抗原:现已有155多个血清群O1群与O139群引起霍乱Ｈ抗原:特异性低O1群古典生物型ElTor生物型4、抵抗力较弱，不耐热对酸敏感，耐碱耐低温对一般消毒剂都敏感对链霉素、氯霉素敏感按比例加漂白粉处理呕吐物、排泄物二、致病性1、致病物质－－鞭毛、菌毛、霍乱肠毒素鞭毛－－运动、穿透穿过肠粘膜粘液层接近肠黏膜细胞菌毛－－粘附、定居作用霍乱肠毒素(CT)：