地黄对罗非鱼的影响

水产动物营养学生命科学学院水产养殖组长：黄建蓉1004314079组员：胡玉萍1004314077杜林珀1004314074吴凡1010214084姚昊辰1004314078赵孜萱1004314073罗非鱼饲喂1%浓度地黄后的多项指标的观察与研究摘要：罗非鱼是典型的杂食性鱼类，本文综述了罗鱼类的摄食活动，对食物的消化，表观消化率，粪便收集和溶酶菌的测定，罗非鱼类对蛋白质、氨基酸、脂肪、碳水化台物、矿物质和维生素的需求。研究了在（20±2）℃条件下，饲料中添加熟地黄浓度（1％）对初始体重为（5.23±0.7）g的尼罗罗非鱼（Tilapianilotica(linnaeus)）幼鱼生长性能、表观消化率及血清非特异性免疫的影响。每组设3个重复，一组对照。每个水族箱内随机放幼鱼20尾，循环过滤水系统饲养4周。通过实验及相关分析，实验得出熟地黄对尼罗罗非鱼的生长性能有促进作用，对其免疫力有增强作用。关键词：罗非鱼；表观消化率；粪便收集；溶菌酶活性测定；Abstract：Thisistypicalofthebearsarefish,thisarticlereviewedthefishingestSaulactivities,thedigestionofthefood,apparentdigestiverate,wastecollectionanddissolvethedeterminationofenzymebacteria,enhancethekindofproteinandaminoacid,fat,carbonhydrationthings,mineralsandvitaminsademand.Theresearchin(20±2)℃conditions,Addcookeddihuangconcentrationfeed(1%)fortheinitialbodyweight(5.23+/-0.7gNileTilapia(Tilapianilotica(Linnaeus))youngfishgrowthperformanceandapparentdigestiverateandserumnonspecificimmunityeffects.Eachgroupsetthreerepeat,asetofcontrols.Withineachaquaticanimalsboxrandomputyoungfish20tail,circulationwaterfiltrationsystemsraise4weeks.Throughtheexperimentsandrelatedanalysis,experimentofNiletilapiarehmanniaglutinosacookedthegrowthofthepropertiesofthefunction,tostrengthentheimmunityfunction.Keyword：tilapia；apparentdigestibility；fecalcollection;determinationoflysozymeactivity；引言：近年来，中草药越来越多的应用于畜禽和水产养殖，用于改善养殖动物免疫力，取得了良好的生产效益。而地黄具有药食兼用，适口性好等特点，作为饲料添加剂可起到营养调控的作用，对增强动物免疫力，降低死亡率，提高营养物质的消化吸收率，提升动物的生长性能具有重要意义。目前其对尼罗罗非鱼的研究尚未发现。本实验在饲料中添加浓度（1％）地黄，探讨其对尼罗罗非鱼的生长性能、表观消化率及血清非特异免疫的影响。一、实验方案1.材料与方法1.1实验用鱼：罗非鱼，河南新乡中文学名：罗非鱼亚纲：辐鳍鱼亚纲拉丁学名：Tilapia目：鲈形目别称：非洲鲫鱼、南鲫、越南鱼亚目：鲈形亚目界：动物界科：丽鱼科门:脊索动物门属：罗非鱼属纲：鱼纲罗非鱼（Tilapia）为一种中小形鱼。现在它是世界水产业的重点科研培养的淡水养殖鱼类，且被誉为未来动物性蛋白质的主要来源之一。原产于非洲，属于慈鲷科之热带鱼类，和鲈鱼相似。通常生活于淡水中，也能生活于不同盐份含量的咸水中，可以存活于在湖，河，池塘的浅水中。它有很强的适应能力，且对溶氧较少之水有极强之适应性。绝大部分罗非鱼是杂食性，常吃水中植物和碎物。此鱼在面积狭小之水域中亦能繁殖。甚至在水稻田里能够生长。食物是促进鱼类生长的最重要的因素之一，鱼类吸取的食物及营养物质的分配利用是有效提高养鱼产量的前提。1.2实验设计与实验饲料80尾平均体重为5g的罗非鱼，选自河南新乡。随机分为两组：对照组和实验组，每组三个重复，每个重复20尾罗非鱼。各组的饲料配比如表1。表1各试验组饲料配比及成份原料对照组Ⅰ（%）试验组Ⅱ（%）试验组Ⅲ（%）试验组Ⅳ（%）次粉20202020鱼粉25252525大豆粕25252525菜粕13131313麸皮12121212大豆油60ml60ml60ml60ml多维0.60.60.60.6多矿1.21.21.21.2胆碱0.60.60.60.6三氧化二铬0.50.50.50.5水5555生地黄提取物01231.3饲养管理试验在河南师范大学水产养殖基地流水养殖系统中进行，六天的暂养，之后用实验饲料投喂。每天饲喂3次：7:30、12:30、19:30，投饲率为2%-4%，饲喂期为21d。饲养结束后测定各组罗非鱼的生长性能、血液溶菌酶活性和表观消化率的表达。2.测定指标2.1生长指标试验结束后，各组的试验罗非鱼采用电子天平逐条称量体重（精确到0.01g）和体长，计算试验罗非鱼的存活率、增重率、饲料系数及饲料转化率。2.2血液免疫指标测定时间2.2.1采样每重复随机取4到10尾鱼，取头肾在生理盐水中研磨制备血清，将所抽取的全血离心10min，取上清，冰箱中冷藏待测。2.2.2溶菌酶活性测定每个样品取3ml菌悬液，吸取0.04ml血清加到3ml菌悬液中，混匀后立刻在25℃，540nm处测定0min和30min的吸光度值。以每分钟吸光度值降低0.001为1个酶活单位2.3表观消化率及饲料干物质的测定2.3.1收粪投喂试验饲粮15天后，采用虹吸法，在每天投喂2h后开始收集粪便,收集时用捞网捞起条状粪便，用镊子选择新鲜、外表带有包膜、尽可能完整的粪便放人干净培养皿中，6O℃烘干，共收集9天的粪便，4℃保存，待测干物质、表观消化率等2.3.2饲料干物质的测定洁净称样皿，在105℃±2℃烘箱中烘1h（以温度到105℃开始计时），取出，盖好称样皿盖，在干燥器中冷却30min称重。再同样烘干1h，冷却称重，直至两次称重之重量差小于0.002g。称取1克饲料，在105℃±2℃烘箱中烘2h取出，盖好称样皿盖，在干燥器中冷却30min称重。再同样烘干1h，冷却称重，直至两次称重之重量差小于0.002g。将称样皿放在干燥器中，待测表观消化率。2.3.3表观消化率的测定（三氧化二铬的测定）称取样品1g，置蒸发皿中，加入20%碳酸钠溶液5ml,使充分浸润,先低温炭化,待浓烟挥尽，移入580℃高温炉中灰化成白色灰烬,冷却。用25ml水分次洗入150ml三角瓶中,加2%高锰酸钾溶液5滴,使成紫红色,煮沸5～10min,煮沸过程中应保持溶液呈紫红色,否则应补充2%高锰酸钾溶液。然后沿瓶壁加入乙醇2ml，继续加热至溶液变为黄棕色,冷却,用5mol/l硫酸调节溶液呈酸性(pH=1～3),摇匀并过滤于50mL容量瓶中,用水洗涤三角瓶和滤纸,合并滤液。溶液经Cr3+定性检查已不显色,证明Cr3+完全转化为Cr6+。加入2.5ml二苯胺基脲溶液摇匀,加水至刻度,10min后于（540±1）nm波长处测定其吸收度。用此法还需测定标准溶液的吸光值，绘制标准曲线。二、实验结果处理及分析1、溶菌酶活性的测定组12340min0.7150.7200.7120.77740min0.6770.6640.6690.743组数酶活单位=前后时间,计算结果绘制曲线如下图2、罗非鱼的饲料利用率（1、2、3试验组，4对照组）饲料利用率=鱼体的增重量投入饲料的总量鱼类未摄食的量×100％由于水体中饲料比较难以收集且量比较少，所以不计算鱼类未摄入的量。罗非鱼：饲料饲喂情况如下表:日期4.25-5.65.7-5.205.21-5.305.30-6.2合计总量12天（2.00％）14天（3.00％）10天（5.33％）3天（20.00％）1(g)30.721953.763468.22870.8048223.71812(g)33.429658.501874.2483.574249.74543(g)33.868859.270475.216984.672253.02814(g)28.93250.63164.353272.33216.2462罗非鱼：饲料利用率及饲料系数项目组数12834初始体重（g）128.008139.29141.12120.55试验末体重（g）188.17203.61200.63168.09净增体重（g）60.16264.3259.5147.54增重率28.15%28.06%25.97%28.28%投喂饲料量（g）223.72249.75253.03216.2500.20.40.60.811.21.41.6123456酶活单位溶菌酶活性的测定系列1组数饲料利用率（％）26.89%25.75%23.52%21.98%饲料平均利用率25.39%21.98%饲料系数3.723.884．254.55平均饲料系数3.954.553、三氧化二铬（Cr2O3）的测定（4为粪便，1、2、3为饲料）试验饲料的干物质的表观消化率=（1-饲料中含量粪便中含量）×100％项目空坩埚（g）材料重量（g）坩埚和材料（g）加热前加热后两次差初始末尾第一次第二次两次差1（g）25.690925.69120.00030.30770.284625.973725.97400.00032（g）23.286223.28580.00040.30340.284523.551323.55180.00053（g）22.850223.85030.00010.30250.284623.130823.13180.00104（g）15.895115.89420.00090.09700.084815.983815.98400.0002注：两次之差≤0.002g。干物质的量的测定组数m0m2m1干物质的量%干物质平均值%对照组s113.364813.550.361.7333383.33333对照组s2）11.884512.17350.396.33333对照组s312.494512.77030.391.93333对照组f112.201712.40950.369.2666772.1对照组f210.677910.89190.371.33333对照组f323.799624.02670.375.7实验组s125.691225.9740.307791.907790.87953实验组s223.285823.55180.303487.67304实验组s322.850323.13180.302593.05785实验组f15.894215.9840.09792.5773292.57732标准曲线：浓度mol／L01.63.24.86.48吸光度值00.611.1221.6332.0022.356组数1234（对照）吸光值1.4591.4371.4501.750表观消化率结果浓度吸光度值表观消化率%对照组s31.6870750.60770．13对照组f11.4217690.529对照组f27.4625852.305对照组f38.0612242.481实验组s14.5850341.45918．39实验组s24.5102041.437实验组s34.5544221.45实验组f5.574831.75三、讨论1.实验中遇到的困难：因为实验涉及的实验时间较长，操作步骤繁琐，个别组员出现懈怠的情况。由于人力的缺乏，阻碍了实验的进程。2.实验数据：在做增重的实验实验，统计最后的数据明显发